Анти-рак: научные исследования

Антиноцицептивный эффект амигдалина,

выделенного из Prunus armeniaca, на боль, вызванную формалином у крыс

оригинал статьи:

 https://www.academia.edu/22726752/Antinociceptive_Effect_of_Amygdalin_Isolated_from_Prunus_armeniaca_on_Formalin_Induced_Pain_in_Rats

Аннотация

Амигдалин — растительный глюкозид, выделенный из косточек розоцветных плодов, таких как абрикосы, персики, миндаль, вишня и слива. Чтобы исследовать обезболивающую активность амигдалина, мы вызывали боль у крыс посредством интраплантарной инъекции формалина и оценивали антиноцицептивный эффект амигдалина в дозах 0,1, 0,5, 1,0 и 10,0 мг/кг веса тела, наблюдая за ноцицептивным поведением, таким как облизывание, кусание и встряхивание, числом Fos-иммунореактивных нейронов в спинном мозге и экспрессией мРНК воспалительных цитокинов в коже подошвы. Внутримышечная инъекция амигдалина значительно уменьшала тоническую боль, вызванную формалином, как в ранней (первые 10 мин после инъекции формалина), так и в поздней фазе (через 10–30 мин после первоначальной инъекции формалина). В поздней фазе амигдалин действительно уменьшал вызванную формалином боль дозозависимым образом в диапазоне доз менее 1 мг/кг. Молекулярный анализ, нацеленный на c-Fos и воспалительные цитокины, такие как фактор некроза опухоли-альфа (ФНО-альфа) и интерлейкин-1 бета (ИЛ-1бета), также показал значительный эффект амигдалина, который соответствовал результатам поведенческого анализа боли. Эти результаты свидетельствуют о том, что амигдалин эффективен для облегчения воспалительной боли и что его можно использовать в качестве анальгетика с антиноцицептивной и противовоспалительной активностью.

Уровень цианида в крови у мышей после введения амигдалина

Оригинал статьи: https://www.researchgate.net/publication/23140431_Antinociceptive_Effect_of_Amygdalin_Isolated_from_Prunus_armeniaca_on_Formalin-Induced_Pain_in_Rats

Абстрактный

Самкам мышей CD2F1 вводили пероральные дозы амигдалина и внутрибрюшинные (ip) дозы цианида калия (KCN) в диапазоне, близком к летальному. Затем измеряли уровни цианида в крови как функцию времени. Максимальный уровень цианида после введения амигдалина достигался примерно через 1,5–2 ч и находился в диапазоне значений, наблюдаемых после введения KCN. Поведение мышей коррелировало со временем максимального уровня цианида в крови. Острый дистресс наблюдался в те моменты, когда уровень цианида был самым высоким. Наблюдалась большая вариабельность в характере и величине реакции у отдельных мышей. Оценивалась способность содержимого различных областей желудочно-кишечного тракта и опухолевой ткани выделять цианид из амигдалина. Желудок и верхняя часть кишечника имели небольшую активность, в то время как нижняя часть и фекалии выделяли большие количества. Опять же, наблюдалась большая вариабельность между мышами. Эти результаты интерпретируются как означающие, что кишечное содержимое в первую очередь ответственно за высвобождение цианида из проглоченного амигдалина. Свежеизмельченная опухолевая ткань выделяла незначительное количество цианида. Десятикратно более высокие дозы амигдалина, вводимые внутрибрюшинно, вызывали очень небольшое увеличение уровня цианида в крови и не вызывали токсического поведения. Использованные дозы сопоставимы с дозами, которые могут быть проглочены пациентами, получающими перорально амигдалин или Laetrile, и указывают на то, что пероральный амигдалин потенциально чрезвычайно опасен.

Терапевтические эффекты и токсичность амигдалина

Информация о статье

Ияну Одуволе 1 , Абдельнасер А 2*

1 Программа по биотехнологии, Школа наук и инженерии, Американский университет в Каире, Каир, Египет 2 Институт глобального здоровья и экологии человека, Школа наук и инженерии, Американский университет в Каире, Каир, Египет

* Автор-корреспондент: Абдельнасер А., Институт глобального здоровья и экологии человека, Школа наук и инженерии, Американский университет в Каире, почтовый ящик: 74, Новый Каир, Египет

Получено: 25 января 2020 г.; Принято: 13 марта 2020 г.; Опубликовано: 15 мая 2020 г.

Цитата:

Ияну Одуволе, Абдельнасер А. Терапевтические эффекты и токсичность амигдалина. Журнал биотехнологии и биомедицины 3 (2020): 039-049.

Абстрактный

Амигдалин — это цианидный гликозид, который естественным образом присутствует во многих фруктах, в основном в горьком миндале, персиках и в химическом виде как лаэтрил. Он вызвал много перекрестных разговоров среди исследователей, особенно по поводу его противоракового потенциала и связанной с ним токсичности цианида. Довольно много отчетов продемонстрировали его химиотерапевтическое действие на различные типы раковых клеток in vitro и очень мало in vivo. Однако его давние несколько клинических неудач и токсичность цианида при различной дозировке сделали его в целом неприемлемым. Однако амигдалин, принимаемый в правильной дозировке перорально, может не привести к токсичности, но это еще не было количественно определено, и на него часто влияет активность микробного содержимого кишечника. Его фармакологическая активность была тщательно изучена, но его противоопухолевая активность все еще неубедительна. Новые клинические исследования с новыми научными подходами могут попытаться дать удовлетворительные ответы о его противоопухолевых эффектах. В этом обзоре обсуждаются метаболизм, различные фармакологические активности, токсичность и современное понимание противоопухолевого эффекта амигдалина.

Ключевые слова

Амигдалин, Токсичность цианида, Противоопухолевый, Метаболизм

Подробности статьи

1. Введение

Амигдалин был впервые выделен в 1830-х годах из горького миндаля Робике и Бутрон-Шарларом, а позднее было обнаружено, что он встречается в природе как цианогенный гликозид в плодах и семенах абрикосов, персиков и горького миндаля [1, 2]. Ферментативный гидролиз амигдалина дает бензальдегид и синильную кислоту, в то время как его кислотный гидролиз дает единственный продукт — гентибиозу. Амигдалин также демонстрирует прегепатический метаболизм, производящий пруназин в кишечнике [3]. Предметом споров был вопрос, вызывает ли амигдалин регрессию опухоли или он токсичен при правильно введенной дозе, что делает его токсичным химикатом, а не терапевтическим препаратом. Многие эксперименты in vitro продемонстрировали, что он способен вызывать апоптотическую гибель клеток и вызывать остановку клеточного цикла или задерживать его прогрессирование в нескольких линиях раковых клеток [4, 5]. В нескольких экспериментах in vivo по изучению противоопухолевых эффектов амигдалина сообщалось о снижении роста ксенотрансплантатов клеток Hela in vivo у голых мышей [4].

Однако амигдалин подвергся критике как терапевтическое средство со стороны многих авторов из-за его многочисленных, постоянных неудач в клинических испытаниях [6]. Лаэтрил, химически модифицированная форма амигдалина, которая, как сообщалось ранее, работала, также не удалась во многих клинических испытаниях, но было высказано предположение, что между ними может быть разница [7]. Исследования, проведенные для оценки токсичности амигдалина, выявили его токсичность, особенно при пероральном приеме, и это привело к его запрету FDA в 1979 году [2]. Более того, семейство анаэробных бактерий, обитающих в кишечнике, способно выделять цианид в кишечнике при распаде амигдалина [2, 8]. Однако роданеза, которая является вездесущим ферментом, обнаруженным в митохондриях многих организмов, способна преобразовывать высокое содержание цианида, образующегося из амигдалина, в безвредный тиоцианат [7]. Амигдалин обладает широким спектром фармакологической активности, включая анальгетическое и противоастматическое действие. В этом обзоре мы рассмотрим противораковое действие и токсичность амигдалина.

2. Метаболизм амигдалина

Первый полный ферментативный и кислотный гидролиз амигдалина был описан Хайсманом и Найтом в 1967 году. Когда амигдалин подвергается воздействию β-глюкозидазы, он дает глюкозу и пурназин. Пурназин далее гидролизуется с образованием глюкозы и другого соединения, называемого мандельнотирилом. Продукт неферментативно превращается в бензальдегид и синильную кислоту. Кислотный гидролиз амигдалина дает единственный продукт — гентибиозу (дисахарид с β-1-6 связью). Кинетику Михаэлиса-Ментен можно использовать для определения стадий вовлеченного ферментативного действия. Были идентифицированы три фермента, которые катализируют на трех различных стадиях, и они включают: амилазу лиазу, пруназин лиазу и гидроксиллиазу. Кроме того, ферменты можно дополнительно очистить с помощью тонкослойной хроматографии [1, 9]. Синильная кислота и глюкозидаза являются двумя основными ключевыми участниками, необходимыми для амигдалина, чтобы вызывать апоптоз и подавлять пролиферацию раковых клеток [7]. Кроме того, производительность глюкозидазы значительно улучшается в присутствии лактата, выделяемого во время анаэробного дыхания раковыми клетками [2]. HCN также способен разрушать раковые клетки, увеличивая кислотное содержание клетки и заставляя лизосому высвобождать свое ферментативное содержимое, тем самым приводя к лизису клеток [7]. Амигдалин был обнаружен в кровотоке крыс сразу после 5 минут введения [10]. Фармакокинетическое исследование амигдалина показало, что амигдалин может проходить два различных метаболических пути [3]. Первый - это прегепатический или первичный метаболизм амигдалина в пруназин в проксимальной части кишечника, а второй путь включает прямой метаболизм в цианид и бензальдегид бактериальным кишечником, которые представляют собой основную токсичность цианида.

Метаболизм перорально вводимого амигдалина в условиях имитированной желудочно-кишечной клеточной культуры показал, что он сначала расщеплялся до пруназина, а затем до минделонитрила под действием β-глюкозидазы, после чего гидроксилировался до гидроксиминделонитрила в тонком кишечнике [11]. На этой фазе не образовывалось ни цианида, ни бензальдегида, и это указывает на то, что цианид, вероятно, образуется в нижнем отделе кишечника, который богат микрофлорой [11]. Концентрацию амигдалина в плазме можно определить методом жидкостной хроматографии-масс-спектрометрии (ЖХ-МС) [10].

3. Фармакологическая активность амигдалина

3.1 Противоастматическое действие

Амигдалин служит для облегчения астмы из-за его разложения, которое производит синильную кислоту, которая может расслаблять дыхательные движения, в определенной степени угнетая дыхательный центр. Также было замечено, что он усиливает синтез легочного сурфактанта в экспериментальной модели животных, страдающих синдромом респираторного заболевания [12, 13]. Сообщалось, что амигдалин защищает альвеолярные эпителиальные клетки II типа (AECIIs), выделенные из легких недоношенных крыс, которые были помещены в условия гипероксии. Это состояние ингибировало пролиферацию AECII и снижало уровни мРНК легочного сурфактанта в AEC II in vitro, тем самым вызывая повреждение легких у недоношенных крыс. Амигдалин в концентрации 200 микромоль/л работал лучше всего, стимулируя пролиферацию AECII недоношенных крыс и повышая уровни мРНК SP [14]. Кроме того, Semen Armeniacae Amarum (SAA), содержащий амигдалин в качестве активного ингредиента, также оказывает противоастматическое действие на мышиную модель аллергической астмы посредством индукции OVA [12]. Было сказано, что SAA снижает уровень интерлейкина (IL)-4 и подавляет активность хелперных Т-клеток 2-го типа (Th2). Гиперреактивность дыхательных путей (AHR) и воспаление дыхательных путей, проявляющиеся при астматических эффектах, были снижены, что может быть связано с изменением ответа Th2 на аллерген.

3.2 Анальгезирующий эффект

Анальгезирующая и противовоспалительная активность амигдалина ранее была протестирована с помощью in vitro липополисахаридной (ЛПС)-индуцированной клеточной линии и крысиной модели с артритом голеностопного сустава, вызванным каррагинаном [15]. Амигдалин, который был извлечен из семян розоцветных косточковых плодов, подавлял уровень экспрессии важных молекулярных маркеров боли и воспаления, включая фактор некроза-α (ФНО-α) и интерлейкин-1β (ИЛ-1β), и уменьшал гипералгезию артритного голеностопного сустава в концентрации 0,0005 мг/кг. Было также продемонстрировано, что амигдалин, извлеченный из Prunus armeniaca, может облегчить боль, вызванную формалином, у крыс, когда уровень дозировки составляет менее 1 мг/кг, что также может быть связано с влиянием на экспрессию воспалительных цитокинов, таких как фактор некроза опухоли-α (TNF-α) и интерлейкин-1β (IL-1β) [13]. Кроме того, он также снижал экспрессию циклооксигеназы (COX)-2, индуцируемой синтазы оксида азота (iNOS), что, следовательно, снижало уровни простагландинов E2 и оксида азота, тем самым вызывая противовоспалительный и анальгезирующий эффект [16]. Тот же эффект был также зарегистрирован в тесте с горячей пластиной и индуцированными уксусом извиваниями, где мыши, которым вводили амигдалин, не демонстрировали никакой реакции прыжка или характерной для морфина реакции поднятия хвоста [17].

3.3 Повышение иммунной системы организма

Амигдалин оказывает антиатеросклеротическое действие, подавляя противовоспалительную реакцию посредством стимуляции иммуномодулирующего эффекта регуляторных Т-клеток (Tregs), что в результате приводит к потере атеросклеротической бляшки, а также к увеличению площади просвета [18]. Также сообщалось, что он стимулирует периферические лимфоциты крови, стимулированные полигидроксиалканоатом PHA, секретирует IL-2 и IFN-γ, тем самым помогая иммунной функции [13]. Пептид T (PT) октапептид, который часто называют аналогом амигдалина из-за схожих пептидомиметиков, как было показано, эффективен при лечении псориаза [19]. Было показано, что PT стимулирует повышенную экспрессию TGF-β, HSP70 и α-v интегрина, а также снижение ICAM-1 в клетках кератиноцитов человека [19]. Кроме того, было показано, что три аналога, полученные из амигдалина, имеющие пептидомиметики и не имеющие цианидной группы, имеют такое же биологическое поведение, как ПТ [19]. Они оказывают такое же иммуномодулирующее действие на клетки кератиноцитов человека, что предполагает их использование при лечении псориаза.

3.4 Влияние амигдалина на пищеварительную систему

Расщепление амигдалина в пищеварительных жидкостях человека и абсорбция его метаболитов в тонком кишечнике в условиях стимулированного пищеварения в ЖКТ и кишечной культуры человека показали влияние амигдалина на стенку кишечника и риск, связанный с его приемом с пищей [11]. Бензальдегид, полученный из амигдалина, может ингибировать активность пепсина и, следовательно, влиять на пищеварительную функцию [13]. Было показано, что введение пепсина крысе, обработанной CCl4, в дозе 500 мг/кг ингибировало уровень АСТ, АЛТ и увеличивало время эуглобулинового лизиса. Кроме того, соединительные ткани печени крысы пролиферируют меньше в присутствии гидролизата пепсина миндальной воды, но пролиферация не была затронута после индукции крыс D-галактозамином из-за восстановленного уровня АСТ и АЛТ [13]. Сообщалось также, что амигдалин оказывает терапевтическое действие на хронический гастрит и хронический атрофический гастрит у крыс [11, 13].

3.5 Антиангиогенный эффект

Сообщалось, что амигдалин подавляет ангиогенез в эндотелиальных клетках диабетических крыс, вызванных стрептозотоцином, за счет снижения количества созревших микротрубочек в аортальном кольце диабетических крыс, леченных амигдалином [20]. Аортальное кольцо крысы без лечения амигдалином мигрировало и пролиферировало после 7 дней инкубации, как было выявлено с помощью оптической микроскопии. Также было высказано предположение, что антиангиогенный эффект амигдалина может также играть роль в его активности подавления опухолей [20].

4. Токсичность цианида амигдалина

Бензальдегид, который отвечает за аромат и вкус фруктов, может быть гидролизован до бензойной кислоты и синильной кислоты (HCN). Последняя в основном ответственна за токсичность, когда амигдалин попадает внутрь или другими путями. Процесс включает ингибирование цитохромоксидазы, которая, в свою очередь, влияет на цепь переноса электронов и митохондрии [2]. Прием амигдалина в его естественной форме, которая является цианогенным гликозидом, может легко привести к токсичности из-за действия бета-глюкозидазы в организме человека [2]. Было установлено, что 4 г амигдалина в день после перорального приема человеком достаточно, чтобы вызвать системную токсичность [13]. Цианид также обладает способностью снижать уровень АТФ в мозге и увеличивать образование лактата, нарушая цикл Кребса [21]. Было зарегистрировано несколько случаев токсичности амигдалина либо при потреблении его исходных фруктов, либо синтетического соединения лаэтрила. Только две из десяти мышей выжили, когда им внутривенно вводили 500 мг/кг амигдалина [13]. Токсичность у мышей могла быть результатом расщепления амигдалина до цианида под действием β-глюкозидазы кишечных микробов у мышей [22]. Исследование было проведено NCI, в котором было зафиксировано шесть случаев его токсичности, и это привело к окончательному запрету амигдалина в 1979 году FDA [2].

Однако несколько исследований показали, что амигдалин, вводимый другими способами, кроме перорального, может не приводить к токсичности. Одно из более ранних исследований показало, что токсичность цианида наблюдалась как у обычных, так и у стерильных крыс, когда амигдалин вводился перорально, но никакой токсичности не наблюдалось при введении парентерально [23]. Недавно сообщалось, что 4-летнему мальчику давали амигдалин без определенной дозировки внутривенно и перорально из абрикосовых косточек, и уровень цианида в сыворотке резко возрос, что привело к отравлению цианидом [1]. Основные симптомы отравления цианидом на ранней стадии включают легкое раздражение, беспокойство, сонливость и головокружение. На поздней стадии отравления цианидом могут наблюдаться судороги, гипотония и сердечно-сосудистый отек [21]. Более того, сообщалось, что высокая доза амигдалина может не вызывать высокой токсичности в организме [1]. Был описан случай пациента, который принял дозу, в два раза превышающую его обычную, но не проявил никаких признаков отравления цианидом. Токсичность цианида может варьироваться от человека к человеку и может зависеть от возраста, ожирения, дозировки, состояния питания и путей введения [2]. Многие из этих факторов влияют на популяцию микробного фермента, ответственного за деградацию амигдалина. Внутривенный путь приводит к меньшей токсичности цианида из-за активности роданезы и отсутствия активности β-глюкозидазы [24]. Роданеза (тиосульфатсульфотрансфераза) способна преобразовывать цианид, выделяемый из амигдалина, в безвредный тиоцианат с помощью тиосульфата, и его распределение в тканях зависит от уровня воздействия цианида на организм [7]. Многие исследования показывают, что роданеза присутствует в больших количествах в нормальной ткани, но отсутствует в раковых клетках [4].

Увеличение массы тела снижает количество бактериодет, но диета с высоким содержанием клетчатки увеличивает популяцию микробов в кишечнике [24]. Сообщалось, что витамин С ускоряет преобразование амигдалина в цианид in vitro и снижает уровень хранения цистеина, необходимого для процесса детоксикации [25]. Прием витамина B12 и серосодержащих аминокислот, таких как метионин и цистеин, также может влиять на детоксикацию цианида, поскольку они влияют на активность фермента роданезы [26]. Витамин B12 действует как хелаторы, связывается с цианокобаламином и способствует выведению цианида через почки. Он используется в качестве антидота цианида, поскольку помогает активировать процесс детоксикации роданезы [26]. Проведенное исследование показало, что гидроксокобаламин может эффективно снижать токсичность цианида, вызванную амигдалином. Крысы, которым вводили гидроксокобаламин после введения амигдалина в терапевтической дозе 20 мг/кг массы тела, показали значительное снижение концентрации лактата и цианида в сыворотке по сравнению с контролем [27]. Кроме того, гистологическое исследование печени не выявило морфологических изменений по сравнению с крысой без антидота. Также сообщалось, что гидроксокобаламин устраняет высокий объем упакованных эритроцитов (PCV) и сниженный pH крови, наблюдаемые у крыс после введения амигдалина. Некоторые крысы, которых кормили амигдалином без последующего приема гидроксокобаламина, не выжили в течение экспериментального периода из-за отравления цианидом, в то время как у крыс, которых кормили антидотами, не было зарегистрировано ни одной смерти. Многие специфические антидоты, включая нитрит, метгемоглобин и соединения кобальта, служат антагонистами цианида, и они использовались при лечении отравления цианидом [28]. Однако в основном применяется поддерживающее лечение, особенно когда признаки и симптомы не могут быть прослежены до истории болезни [28]. Как правило, тот же метод лечения отравления цианидом из других источников, таких как маниока и цианистые соединения, можно распространить и на отравление амигдалином.

5. Влияние кишечной микробной флоры на амигдалин

Метаболизм препарата или любого чужеродного соединения, поступающего в организм, зависит от ЖКТ, просвета, кишечника и кишечных микробов, особенно при приеме внутрь [2]. Firmicutes, Bacteriodetes и Actinobacteria являются основными группами бактерий, способствующими выделению цианида в кишечнике, и они в основном являются анаэробами [2]. Кишечник содержит множество ферментов, включая нуклеазы, липазы, трансферазы и пептидазы, а также ферменты микрофлоры [2]. Было показано, что кишечная β-глюкозидаза и микробная β-глюкозидаза работают на разных субстратах и ​​дают разные продукты. β-глюкозидаза, которая является лактазефлоризингидролазой (LPH) и цитозольной β-глюкозидазой (CBG), обнаруженная в слизистой оболочке кишечника, расщепляет гликозидные связи и действует на другие соединения, такие как желчь и жирные кислоты, образуя канцерогены. Кишечная β-глюкозидаза также может преобразовывать амигдалин в пруназин, при этом синильная кислота не образуется [1].

Другая β-глюкозидаза из микробов, находящихся в кишечнике, в основном гидролизует амигдалин до HCN. Несколько исследований показали, что кишечные бактерии могут гидролизовать амигдалин до цианида, и это пропорционально количеству микробного содержимого кишечника [8]. Кроме того, токсичность, вызванная гидролизом амигдалина, была значительно снижена, когда рост кишечных микробов был подавлен у мышей, которым вводили 300 мг/кг, в то время как у нелеченых мышей токсичность вызывала токсичность и показывала уровень смертности на 60% выше [29, 30]. Было показано, что человеческий стул гидролизует около 50% амигдалина до цианида из-за избыточной присутствующей флоры по сравнению с таковой у мышей и обезьян [8]. Bacteriodetes в основном используются для производства глюкозидазы. Пребиотики и пробиотики влияют на бактериальную популяцию в кишечнике и регулируют ее [31]. Пребиотики — это биологические молекулы, в то время как пробиотики — это организмы, которые модулируют активность микробиоты кишечника на благо хозяина. Пребиотики способны связывать или поглощать канцерогены и снижать риск токсичности цианида от амигдалина. Было показано, что Lactobacillus и Bifidobacterium снижают активность β-глюкозидазы от Bacteriodetes [31].

6. Противораковая активность амигдалина

Считается, что амигдалин в изобилии содержится в семенах некоторых растений, включая абрикосы, яблоки, миндаль и персики, и это дает возможность протестировать его на многих раковых клетках. Чен и др. впервые сообщили о раке шейки матки, что амигдалин оказывает апоптотическое действие на линию клеток Hela рака шейки матки. Сообщалось, что обработанные амигдалином линии клеток Hela сначала окрашивались 4,6-диамино-2-фенилиндолом (DAPI), после чего обрабатывались аннексином V-FITC и пропидиум-йодидом соответственно. Действие антиапоптотических белков BcL-2 было снижено, а проапоптотических белков Bax — увеличено. Также наблюдалось увеличение активности каспазы и инициирование внутренних апоптотических путей. Было высказано предположение, что амигдалин оказывает терапевтическое действие на рак шейки матки за счет снижения жизнеспособности клеток Hela in vitro . Кроме того, тот же результат был также сообщен для ксенотрансплантата клеток Hela in vivo . Более того, ранее сообщалось о том, что эффект амигдалина, извлеченного из семени Armenlacae , принадлежащего к семейству пруназинов, был протестирован на клетках рака простаты DU 145 и LN CAT [32]. Было заявлено об увеличении ферментов каспазы 3 с понижением регуляции антиапоптотического белка BcL-2 и повышением регуляции белков Bax. Считается, что экстракт амигдалина вызвал апоптотическую гибель клеток рака простаты человека [32].

Химиопрофилактический потенциал амигдалина также был протестирован на клетках рака молочной железы in vitro . Сообщалось, что он вызывал цитотоксичность клеток MCF7, положительных по рецептору эстрогена (ER), MDA-MB-237 и клеток рака молочной железы Hs 578T с тройным отрицательным статусом (TNBC). Кроме того, те же действия были замечены с BcL-2, Bax и каспазами [33]. Кроме того, стимулировались митоген-активируемые протеинкиназы p38 (p38 MAPK), проапоптотическая сигнальная молекула, и дальнейшее лечение амигдалином также ингибировало адгезию клеток рака молочной железы Hs 578T. Было показано, что амигдалин может быть эффективен в отношении клеток рака молочной железы. Похожий случай адгезии также был зарегистрирован в клетках рака мочевого пузыря [5]. Отчетливое снижение адгезивности опухолевых клеток UMUC-3, клеток RT112 и клеток TCCSUP было зарегистрировано после 24-часовой или 2-недельной обработки амигдалином. Снижение миграции было отмечено для первых двух раковых клеток, но TCCSUP показал увеличение миграционного свойства [5]. Авторы предположили, что противораковая активность амигдалина может быть специфична для некоторых линий раковых клеток. Такой же случай был зарегистрирован с клетками рака шейки матки, где амигдалин показал терапевтический эффект против линии клеток Hela, но не против клеток FL [4].

Сообщалось, что рацемизация амигдалина в нео-амигдалин в водном растворе препятствует его противораковой активности в клетках промиелоцитарного лейкоза [34]. Было должным образом сообщено, что хроматография ВЭЖХ выявила экстракт амигдалина из семени Persicae как активную форму D, и поэтому экстракт кипятили для ингибирования процесса эпимеризации перед нанесением его на клетки промиелоцитарного лейкоза (HL-60). Также было зафиксировано увеличение гибели клеток, что, как предполагалось, было вызвано процессом апоптоза. Кроме того, также сообщалось о замеченных морфологических изменениях в ядре и фрагментации ДНК клеток [34]. Терапевтический эффект амигдалина был также продемонстрирован для клеток немелкоклеточного рака легких (НМРЛ) линии H1299 и PALM in vitro [35]. Антипролиферация клеток происходила при высокой концентрации амигдалина, ингибирование миграции и инвазивности происходило при низкой концентрации раствора.

6.1 Амигдалин задерживает прогрессирование клеточного цикла в некоторых раковых клетках

Амигдалин также проявляет свою противоопухолевую активность посредством влияния или модификации некоторых белков, участвующих в клеточном цикле. Помимо индукции апоптоза клеток PC3 и LNCaP при раке простаты после лечения в течение как 24 часов, так и 2 недель, амигдалин также, как сообщалось, вызывал снижение клеток фазы G2/M и повышение клеток фазы G0/G1 [5]. Кроме того, была также отмечена модуляция некоторых белков клеточного цикла, таких как циклины, cdks. Тот же случай был зарегистрирован в клетках рака толстой кишки, где наблюдалась пониженная регуляция некоторых белков цикла, в основном экзонуклеазы, топоизомеразы и связывающего белка в обработанных амигдалином клетках SNu-C4 [36]. Авторы использовали анализ микрочипов кДНК для выражения пониженной регуляции белков, и снижение уровня их мРНК также было отмечено с помощью анализа ОТ-ПЦР.

7. Амигдалин в клинических испытаниях

Один из ранних сторонников лаэтрила (химически модифицированная форма амигдалина), как сообщается, сказал, что «лаэтрил работает», это была одна из трех причин, по которым он выживал в течение многих лет [37]. Более того, сэр Эрнст Кребс-младший, который, как говорили, считал, что рак имеет дефицит витамина, предположил, что амигдалин может быть недостающим витамином. Он публично заявил, что лаэтрил является витамином B17, и это было принято многими американцами и политическими деятелями в середине 1970-х годов, но позже критически опровергнуто через некоторое время.

Недавно опубликованный обзор «Амигдалин: шарлатанство или лекарство» Блахеты и др. предоставил общие и актуальные знания об испытаниях амигдалина. В обзоре после рассмотрения обрывков журналов из базы данных Pubmed и соответствующих интернет-источников сообщалось, что нет никаких надлежащих и убедительных доказательств того, что амигдалин может положить конец этому смертельному системному заболеванию, и, таким образом, это решение остается неокончательным. Было сказано, что клиническое испытание на онкологических пациентах показало, что он не вызывает апоптоза или регрессии опухоли в раковых клетках, особенно на последней стадии. Однако авторы также пришли к выводу, что очищенный амигдалин при введении не вызывает токсичности для нормальных клеток. Кроме того, автор не установил терапевтический потенциал амигдалина при многократном введении.

Другая группа исследователей из Cancer Networks отвергла лаэтрил, химически модифицированную форму амигдалина, как лекарство от рака. Это было приписано тем же ложным убеждениям, которые люди имеют о СПИДе как болезни, пропагандируемой для искоренения чернокожих людей, и о том, что аутизм был вызван вакцинами. Сообщалось, что лаэтрил не дал результатов у 175 клинических пациентов и в 20-летних исследованиях на животных [6]. Однако его недавнее широкое использование было приписано мошенническим интернет-источникам, которые представили его как основное лекарство от рака, а не альтернативную терапию [6]. Также было заявлено, что лаэтрил не может быть подкреплен никакими клиническими данными после изучения около тридцати отчетов из разных публикаций [7]. Автор утверждал, что может быть разница между амигдалином и его предполагаемыми химически полученными соединениями лаэтрил, продаваемыми на рынке.

8. Обсуждение и перспективы на будущее

Роль амигдалина в лечении рака вызвала критические дебаты среди ученых со множеством противоречивых публикаций и перекрестных разговоров о его токсичности. Несколько экспериментальных результатов, особенно in vitro, подтвердили противоопухолевую активность амигдалина. Тем не менее, его противоопухолевая активность неубедительна из-за неудач клинических испытаний и токсичности при больших дозировках [13, 38, 39]. Амигдалин был хорошо известен среди онкологических больных в 1970-х годах, где он в основном использовался как одно из дополнительных и альтернативных лекарств от рака [1, 6]. Однако его использование угасло через несколько десятилетий, но недавно возобновилось из-за интернет-рекламы, которую многие исследователи считали мошенничеством из-за некачественных научных отчетов относительно его эффективности [1]. Многие критики амигдалина по-прежнему полагались на устаревшие научные доказательства, которые могли ограничить его исследовательский охват [1]. Противораковый потенциал амигдалина не следует недооценивать, особенно с учетом того, что его апоптотическое действие было продемонстрировано на различных типах рака in vitro . Кроме того, его терапевтический эффект на ксенотрансплантаты клеток Hela in vivo также был проведен [4]. Установлено, что недавние тщательные клинические исследования его противоопухолевого эффекта и токсичности не проводились, и многие новые научные подходы не были направлены на его изучение [1, 13]. Антитело может быть полезным для безопасной доставки амигдалина без токсичности, но ни одно клиническое исследование не доказало этого, чтобы сделать возможным его терапевтическое использование [2]. До сих пор нет удовлетворительного ответа на его противоопухолевый эффект и токсичность, но мы надеемся прояснить эту неопределенность после достаточного количества исследований in vivo и клинических исследований.

Таблица 1: Сводка противораковых эффектов амигдалина in vitro.

Конфликт интересов

Авторы заявляют об отсутствии конфликта интересов.

Благодарности

IO является получателем стипендии AUC African Graduate Fellowship (AGF), а AA — получателем внутреннего гранта AUC.

Ссылки

1. Блахета РА, Нельсон К, Хаферкамп А и др. Амигдалин, шарлатанство или лекарство?. Фитомедицина 23 (2016): 367-376.
2. Джасвал В., Паланивелу Дж. К. Р. Влияние микробиоты кишечника на амигдалин и его использование в качестве противораковой терапии: содержательный обзор ключевых компонентов, участвующих в изменении эффективности и токсичности дозы. Biochem. Biophys. Rep 14 (2018): 125-132.
3. Strugala GJ, Rauws AG, Elbers R. Кишечный метаболизм амигдалина первого прохождения у крыс in vitro. Biochem. Pharmacol 35 (1986): 2123-2128.
4. Chen Y, Ma J, Wang F и др. Амигдалин индуцирует апоптоз в клетках линии рака шейки матки человека HeLa. Иммунофармакол. Иммунотоксикол 35 (2013): 43-51.
5. Макаревич Дж., Цаур И., Юнгель Э. и др. Амигдалин задерживает прогрессирование клеточного цикла и блокирует рост клеток рака простаты in vitro. Life Sci 147 (2016): 137-142.
6. Кассилет Б. Р., Яретт II Р. Шарлатанство в лечении рака: постоянная популярность бесполезных, нерациональных альтернативных методов лечения. Онкология 26 (2012).
7. Милаццо С., Лежен С., Эрнст Э. Лаэтрил при раке: систематический обзор клинических данных. Поддержка. Уход за раком 15 (2007): 583-595.
8. Newton GW, Schmidt ES, Lewis JP и др. Исследования токсичности амигдалина на крысах предсказывают хроническое отравление цианидом у людей. West J Med 134 (1981): 97.
9. Хайсман Д.Р., Найт Д.Дж. Ферментативный гидролиз амигдалина. Biochem. J 103 (1967): 528.
10. Ли X, Лю C, Чжан R и др. Определение и фармакокинетика амигдалина у крыс методом ЖХ-МС-МС. J. Chromatogr. Sci 52 (2013): 476-481.
11. Шим SM, Квон Х. Метаболиты амигдалина в моделируемых пищеварительных жидкостях человека. Int. J. Food Sci. Nutr 61 (2010): 770-779.
12. Do JS, Hwang JK, Seo HJ и др. Противоастматическая активность и селективное ингибирование реакции Т-хелперов 2-го типа водным экстрактом семени Armeniacae Amarum. Иммунофармакол. Иммунотоксикол 28 (2006): 213-225.
13. Сонг Z, Сюй X. Расширенные исследования противоопухолевых эффектов амигдалина. J. Cancer Res. Ther 10 (2014): 3-7.
14. Chang L, Zhu H, Li W и др. Защитное действие амигдалина на альвеолярные эпителиальные клетки II типа, подвергшиеся воздействию гипероксии, выделенные из легких недоношенных крыс in vitro. Zhonghua Er Ke Za Zhi Chin. J. Pediatr 43 (2005): 118-123.
15. Hwang HJ, Lee HJ, Kim CJ и др. Ингибирующее действие амигдалина на экспрессию мРНК TNF-альфа и IL-1бета, индуцируемую липополисахаридом, и артрит у крыс, вызванный каррагинаном. J Microbiol Biotechnol 18 (2008): 1641-1647.
16. Yang HY, Chang HK, Lee JW и др. Амигдалин подавляет вызванную липополисахаридом экспрессию циклооксигеназы-2 и индуцибельной синтазы оксида азота в микроглиальных клетках мыши BV2. Neurol. Res 29 (2007): 59-64.
17. Чжу Ю.П., Су З.В., Ли Ч. Анальгетический эффект и отсутствие физической зависимости от амигдалина. Чжунго Чжун Яо За Чжи Чжунго Чжунъяо Зажи Китай Дж. Чин. Матер. Медика 19 (1994): 105-107.
18. Цзяган Д., Ли Ч., Ван Х. и др. Амигдалин опосредует облегчение атеросклероза у мышей с дефицитом аполипопротеина Е посредством индукции регуляторных Т-клеток. Biochem. Biophys. Res. Commun 411 (2011): 523-529.
19. Барони А., Паолетти И., Греко Р. и др. Иммуномодулирующие эффекты набора аналогов амигдалина на клетки кератиноцитов человека. Exp. Dermatol 14 (2005): 854-859.
20. Mirmiranpour H, Khaghani S, Zandieh A, et al. Амигдалин ингибирует ангиогенез в культивируемых эндотелиальных клетках диабетических крыс. Indian J. Pathol. Microbiol 55 (2012): 211.
21. Бисли ДМГ, Гласс Висконсин. Отравление цианидом: патофизиология и рекомендации по лечению. Occup. Med 48 (1998): 427-431.
22. Картер Дж. Х., Маклафферти МА, Голдман П. Роль желудочно-кишечной микрофлоры в токсичности цианида, вызванной амигдалином (лаэтрилом). Biochem. Pharmacol 29 (1980): 301-304.
23. Коутс М.Е., Уокер Р. Взаимоотношения между желудочно-кишечной микрофлорой и непитательными компонентами рациона. Nutr. Res. Rev 5 (1992): 85-96.
24. Chong ESL. Потенциальная роль пробиотиков в профилактике колоректального рака: обзор возможных механизмов действия. World J. Microbiol. Biotechnol 30 (2014): 351-374.
25. Бромли Дж., Хьюз Б.Г., Леонг Д.К. и др. Угрожающее жизни взаимодействие между дополнительными лекарственными средствами: токсичность цианида после приема амигдалина и витамина С. Ann. Pharmacother 39 (2005): 1566-1569.
26. Чан Т.Ю. Вероятный случай периферической нейропатии, вызванной амигдалином, у вегетарианца с дефицитом витамина В12. Ther. Drug Monit 28 (2006): 140-141.
27. Оеволе О.И., Олайинка Э.Т. Гидроксокобаламин (витамин B12a) эффективно снижает степень отравления цианидом, возникающего при пероральном приеме амигдалина у крыс. J. Toxicol. Environ. Health Sci 1 (2009): 008-011.
28. Way JL. Цианидная интоксикация и механизм ее антагонизма. Annu. Rev. Pharmacol. Toxicol 24 (1984): 451-481.
29. Хандекар Дж. Д. Токсичность амигдалина (лаэтрила) у грызунов. JAMA 243 (1980): 2396-2396.
30. Сток CC. Токсичность амигдалина (лаэтрила) у грызунов. JAMA 242 (1979): 2287-2287.
31. Стир TE, Джонсон IT, Джи JM и др. Метаболизм соевого изофлавонового гликозида генистина in vitro кишечными бактериями человека и влияние пребиотиков. Br. J. Nutr 90 (2003): 635-642.
32. Chang HK, Shin MS, Yang HY и др. Амигдалин индуцирует апоптоз посредством регуляции экспрессии Bax и Bcl-2 в клетках рака простаты человека DU145 и LNCaP. Biol. Pharm. Bull 29 (2006): 1597-1602.
33. Ли Х. М., Мун А. Амигдалин регулирует апоптоз и адгезию в клетках тройного негативного рака молочной железы Hs578T. Biomol. Ther 24 (2016): 62.
34. Хи-Янг К., Сон-Пё Х., Донг-Хун Х. и др. Индукция апоптоза экстрактом Persicae Semen в клетках промиелоцитарного лейкоза человека (HL-60). Arch. Pharm. Res 26 (2003): 157.
35. Qian L, Xie B, Wang Y и др. Ингибирование инвазии клеток немелкоклеточного рака легких in vitro с помощью амигдалина. Int. J. Clin. Exp. Pathol 8 (2015): 5363.
36. Park HJ, Yoon SH, Han LS и др. Амигдалин ингибирует гены, связанные с клеточным циклом в клетках рака толстой кишки человека SNU-C4. World J. Gastroenterol. WJG 11 (2005): 5156.
37. Лернер И. Дж. Причины шарлатанства в области рака. Cancer 53 (1984): 815-819.
38. Barwina M, Wiergowski M, Sein JA. Случайное отравление семенами персика, используемыми в качестве противораковой терапии – отчет о двух случаях. Przegl. Lek 70 (2013): 687-689.
39. Шилс М.Е., Герман М.Г. Недоказанные диетические утверждения при лечении пациентов с раком. Bull. NY Acad. Med 58 (1982): 323.

преведено с английского SAID-lab.com

Амигдалин как перспективный противораковый агент:

молекулярный Механизмы и будущие перспективы развития Новые наноформулы для его доставки

Аннотация: Уровень заболеваемости раком растет, и рак является одной из основных причин смертности во всем мире. Амигдалин, также известный как витамин B17 (и лаэтрил, синтетическое соединение), представляет собой цианогенное гликозидное соединение, которое в основном содержится в ядрах и мякоти фруктов. Это соединение на протяжении десятилетий предлагалось как многообещающее природное вещество, которое может оказывать противораковое действие. Это всеобъемлющий обзор, в котором критически обобщаются и тщательно анализируются имеющиеся исследования, изучающие противораковый эффект амигдалина, подчеркиваются его потенциальные противораковые молекулярные механизмы, а также необходимость создания нетоксичной рецептуры этого вещества. Углубленное исследование проводилось с использованием наиболее точных научных баз данных, например, PubMed, Cochrane, Embase, Medline, Scopus и Web of Science, с применением эффективных, характерных и релевантных ключевых слов. Есть несколько доказательств, подтверждающих идею о том, что амигдалин может оказывать противораковое действие при раке легких, молочной железы, простаты, колоректального рака, рака шейки матки и желудочно-кишечного тракта. Сообщалось, что амигдалин индуцирует апоптоз раковых клеток, ингибируя пролиферацию раковых клеток и замедляя метастатическое распространение опухоли. Однако на моделях животных in vivo было проведено лишь несколько исследований , а клинические исследования остаются еще более скудными. Имеющиеся данные не могут поддержать рекомендации по использованию пищевых добавок с амигдалином из-за его цианогруппы, которая вызывает неблагоприятные побочные эффекты. Предварительные данные показали, что использование наночастиц может быть многообещающей альтернативой для усиления противоракового эффекта амигдалина при одновременном снижении его неблаго Амигдалин, по-видимому, является многообещающим природным агентом против развития и прогрессирования раковых заболеваний. Тем не менее, существует большая потребность в исследованиях на животных in vivo , а также клинических исследованиях на людях для изучения потенциальной эффективности профилактики и/или лечения амигдалина против рака. Более того, амигдалин можно использовать в качестве ведущего соединения, эффективно применяя последние разработки в процессах разработки лекарств.

1. Введение

Характеристика глобальных изменений бремени болезней и тенденций с течением времени дает важную информацию об этиологии рака и служит основой для стратегий профилактики и лечения. Злокачественные новообразования считаются основной причиной смертности во всем мире; число новых случаев рака во всем мире достигло 19,3 миллиона, и в 2020 году умерло почти 10 миллионов человек [1]. Вызывают тревогу новые данные, согласно которым число новых случаев заболевания с 2020 по 2040 год во всем мире составит 28,4 миллиона человек [2]. Кроме того, самые последние данные Всемирной организации здравоохранения (ВОЗ) показывают, что рак молочной железы остается наиболее распространенным злокачественным заболеванием у женщин в 158 из 183 стран (86%) и основной причиной смертности от рака в 173 из 183 стран.

95%) [3]. По данным Глобальной статистики рака 2020 года (GLOBOCAN) второй наиболее распространенной причиной смертности от рака во всем мире и третьей по распространенности злокачественной опухолью с точки зрения диагностики является колоректальный рак [1,4]. Более того, текущие модели смертности и долгосрочные тенденции для основных типов рака в 47 странах мира, исключая Африку, показывают, что уровень заболеваемости раком, связанным с инфекциями, таким как рак шейки матки и рак желудка, и раком, связанным с курением, таким как рак легких и пищевода, увеличились примерно в 10 раз [5]. В Европейском Союзе (ЕС) общее прогнозируемое число смертей от рака в 2023 году оценивается в 1 261 990 (702 214 среди мужчин, 559 776 среди женщин) [6]. Общая смертность от рака в 2022 году оценивалась в 1 269 200 [7], при этом колоректальный рак и рак легких были ведущими причинами смертности от рака (>30%)в ЕС. В Греции число новых случаев в 2020 г. составило 64 530, а количество смертей — 33 166 [5–7]. В США число новых случаев рака в 2023 году составит примерно 1 958 310, или примерно 5 370 случаев в день [8]. В этом контексте следует отметить, что эти оценки случаев на 2023 г. основаны

на недавно доступных данных о заболеваемости до 2019 г. и не учитывают влияние пандемии COVID-19 на

Соответственно, прогноз смертности от рака в 2023 году основан на данных до 2020 года [8].

Темой, представляющей интерес, является роль амигдалина, также известного как витамин B17 или лаэтрил (его синтетическое соединение), в профилактике и/или совместном лечении рака. Несколько исследований продемонстрировали широкий спектр биологических свойств амигдалина, предполагая, что он может оказывать профилактическое или даже сопутствующее воздействие на рак шейки матки, молочной железы, простаты, легких и мочевого пузыря, что в основном можно объяснить ингибированием рака. пролиферация клеток [9–13]. Как in vitro , так и in vivo оценки биологического действия экстрактов амигдалина из трех сортов маниоки (Manihot esculenta), выращенных в Бенине, продемонстрировали, что эта встречающаяся в природе молекула может эффективно действовать в профилактике рака и совместном лечении, подавляя образование раковых клеток [14]. ]. Исследования in vitro задокументировали индукцию апоптоза амигдалином из-за увеличения экспрессии белка Bax и каспазы-3 и снижения экспрессии антиапоптотического белка Bcl-2 [15,16]. В области химиопрофилактического потенциала амигдалина Erikel et al. (2023) отметили, что амигдалин может оказывать модулирующее действие на химиотерапевтические агенты, которые, по-видимому, вызывают геномные повреждения лимфоцитов человека [17].

Основные противораковые молекулярные механизмы амигдалина в основном связаны с ингибированием клеточного цикла, индукцией апоптоза, стимуляцией цитотоксического эффекта и регуляцией иммунной функции в организме человека [15,18,19]. Более того, основным молекулярным механизмом апоптоза является активация протеазы каспазы-3, которая инициируется клеточной репликацией белка Bax цитохрома С [20]. Высокая экспрессия проапоптотического белка Bax связана с апоптозом и последующей пролиферацией клеток [ 21]. В связи с этим считается, что амигдалин индуцирует апоптоз за счет увеличения активности каспазы-3 в клетках HeLa и подавления Bcl-2 [22]. Параллельно выяснилось, что Bax активируется в клетках HeLa, обработанных амигдалином, что позволяет предположить, что в апоптозе может быть задействован эндогенный путь [22]. Несколько линий клеток человека, в том числе раковых клеток легких, молочной железы, толстой кишки, яичек, предстательной железы, прямой кишки и мочевого пузыря, показали, что амигдалин может вызывать апоптоз и остановку клеточного цикла [19,20,22–26].

Несмотря на многообещающие результаты имеющихся в настоящее время исследований по изучению противораковых

эффектов амигдалина, существует большая потребность в дальнейших исследованиях по этой теме. На сегодняшний день Управление по санитарному надзору за качеством пищевых продуктов и медикаментов (FDA) не одобрило медицинское использование амигдалина.

при одновременном лечении рака или других заболеваний в США, поскольку отсутствия адекватных данных об эффективности амигдалина и риске потенциального

неблагоприятные побочные эффекты [27,28]. В связи с этим целью настоящего обзора было критически обобщить и тщательно изучить имеющиеся данные о потенциальных противораковых эффектах амигдалина, подчеркивая его противораковые молекулярные механизмы и его возможное будущее применение в клинической практике борьбы с раком.

1. Методы

Всесторонний и углубленный обзор был проведен с использованием наиболее точных научных баз данных, например, PubMed, Scopus, Web of Science и Google Scholar, с применением

эффективные, характерные и релевантные ключевые слова, такие как «амигдалин» или «лаэтрил» или «витамин B17» и «токсичность», «противоопухолевые эффекты» и/или «рак» и «молекулярные механизмы».

Критериями включения были исследования, написанные на английском языке, клинические исследования на людях,

исследования на животных in vitro и in vivo , а также рандомизированные клинические исследования (РКИ). Серая литература,

комментарии, редакционные статьи, письма в редакцию, рецензии, тезисы в материалах конференций,

а статьи в нерецензируемых журналах были исключены из окончательного анализа.

поиск был дополнен сканированием списков литературы соответствующих исследований и ручным

поиск ключевых журналов, комментариев, редакционных статей и тезисов в материалах конференций . Полученные опросы были дополнительно тщательно проверены на предмет наличия соответствующих исследований.

цитируются в их тексте.

Все авторы выступали в качестве рецензентов. Чтобы повысить согласованность действий рецензентов, все рецензенты

проверил все полученные публикации, обсудил результаты и внес изменения в процедуру проверки и

руководство по извлечению данных перед началом проверки для этого обзора. Все рецензенты работали в парах последовательно оценить названия, аннотации, а затем полные тексты всех публикаций

выявленные в ходе поиска потенциально релевантных публикаций. Мы разрешили разногласия по

отбор исследований и извлечение данных путем консенсуса и обсуждения со всеми авторами/рецензентами,

если нужно. Форма диаграммы данных была совместно разработана двумя рецензентами (MS и CG) для

определить, какие переменные следует извлечь. Два рецензента независимо друг от друга составили диаграммы данных.

обсуждали результаты и постоянно обновляли форму диаграммы данных в рамках итеративного процесса.

1. Результаты

3.1. Амигдалин: основная информация и свойства

Амигдалин был открыт в 1803 году Шрейдером при исследовании ингредиентов горького миндаля.

и был впервые выделен в 1830 году двумя французскими химиками, Пьером-Жаном Робике и Антуаном.

Франсуа Бутрон-Шарлар [29,30]. Химики Хауорт и Уайлам наконец определились.

его точная химическая структура в 1923 году (рис. 2) [31]. Амигдалин (d-манделонитрил-β-d- глюкозид-6-β-глюкозид) представляет собой цианогенное гликозидное соединение, состоящее из дибензальдегида , синильной кислоты и двух молекул глюкозы (D-манделонитрил-β-D-глюкозид- 6 -глюкозид). β-глюкозид) [32]. Его биоактивная форма (D-манделонитрил-β-глюкоза) была использована в

Патент штата (USP). Лаэтрил — частично искусственная, синтетическая форма природного вещества.

амигдалин (рис. 2) [32]. В Мексике структура была дифференцирована и определена как D- манделонитрил-β-гентиобиозид [33]. Национальный центральный институт США (NCI) продемонстрировал

что мексиканская форма амигдалина (пероральная и внутривенная) не соответствует требованиям препарата США. стандартам, и это вещество было запрещено для потребления человеком [33]. Амигдалин в основном содержится в ядрах и мякоти таких фруктов, как сливы, абрикосовые косточки, черешня, персики.

Цитотоксический эффект амигдалина на раковые клетки in vitro и распределение амигдалина в растениях, которые

Содержаниеобычнопотребляютсяамигдалинаврационеврастенияхчеловека,являются,которыедвумяобычноизних.употребляются в пищу человеком, являются

наиболеедвумянаиболееинтересныеинтереснымитемыпоследнихтемамиисследованийнедавнихиссле.Однакоованийэто. Однаконеновоеэтосоединениеновое,соединениеоновеками, и оно имеет использовалось в традиционной и альтернативной медицине из-за его противораковых и противораковых свойств. использовался в традиционной и альтернативной медицине на протяжении веков благодаря своим противораковым

противовоспалительнымьныесвойствам и, в целом,,многочисленнымегомногочисленныемедицинскицинскиемпреимуществампреимущества[35,36,38][35,36,38].Это.

Это помогло облегчить боль и лихорадку; подавление кашля, жажды и тошноты; и в качестве

помог облегчить боль и лихорадку; подавление кашля, жажды и тошноты; и средство для профилактики

• сопутствующего лечения рака в последние годы [39,40].

• качестве средства профилактики и сопутствующего лечения рака в последние годы [39,40].

3.2. Противораковые эффекты и молекулярные механизмы амигдалина: данные in vitro и in vivo

3.2. Противораковые эффекты и молекулярные механизмы амигдалина: данные in vitro и in vivo

На сегодняшний день в нескольких исследованиях изучались потенциальные противораковые эффекты амигдалина.

На сегодняшний день несколько исследований изучили потенциальные противораковые эффекты амигдалина,

подчеркнув его противораковые молекулярные механизмы, особенно в легких, молочной железе, предстательной железе,

подчеркивая его противораковые молекулярные механизмы, особенно при раке легких, молочной железы, предстательной

железы, колоректального рака, рака шейки матки и желудочно-кишечного тракта. Потенциальные противораковые эффекты и

рак прямой кишки, шейки матки и желудочно-кишечного тракта. Потенциальные противораковые

эффекты и молекулярные механизмы амигдалина изображены на рисунке 3. Клинические исследования на людях

Механизмы действия амигдалина изображены на рисунке 3. Клинические исследования на людях, а

также на раковых клетках человека и животных представлены в таблице 1.

а также в раковых клетках человека и животных представлены в табл. 1.

3.2.1. Рак легких

Амигдалин может быть полезен в качестве вспомогательного терапевтического средства при опухолях легких.

Этот ком- 3.2.1. Рак легких

фунт значительно индуцировал апоптоз клеток рака легких A549 и PC9 в определенной дозе. Амигдалин может быть полезен в качестве совместного терапевтического агента при опухолях легких. Этот взаимозависимый путь посредством митохондриально-опосредованного и каспазозависимого апоптоза

 значительно индуцировал апоптоз клеток рака легких A549 и PC9 в дозовом пути [41]. Одновременно в клетках рака легких A549 и PC9 наблюдалось увеличение цитохрома C и усиление каспазозависимой активности посредством

митохондриально-опосредованной и каспазозависимой активности апоптоза 9 и каспазы-3. В пробирке

путь [41]. Одновременно увеличение цитохрома С и усиление каспаз- ингибирования пролиферации клеточных линий рака легкого H1299/M и PA/M требовали высокой

Активность 9 и каспазы-3 наблюдалась в клетках рака легких A549 и PC9. In vitro ингибируют концентрацию амигдалина [42]. Однако при более низкой концентрации амигдалина это было

Для пролиферации клеточных линий рака легких H1299/M и PA/M требовалась высокая концентрация. Было обнаружено, что инвазионная и миграционная способность раковых клеток H1299/M PA/M была

амигдалина [42]. Однако при более низкой концентрации амигдалина наблюдалось его значительное ингибирование [42]. Таким образом, было высказано предположение, что амигдалин, вероятно, обладает способностью к инвазии и

миграции раковых клеток H1299/M PA/M, обладая значительной временной метастатической активностью, индуцируя апоптоз и ингибируя пролиферацию рака легких.

отношенииингибируетсяклеток[42]. [42]Таким. образом, было высказано предположение, что амигдалин, вероятно, обладает антиметастатической активностью в

индуцируя апоптоз и ингибируя пролиферацию клеток рака легких [42].

3.2.2. Рак молочной железы

3.2.2. Рак молочной железы

Было показано, что амигдалин индуцирует апоптоз и ингибирует адгезию молочной железы.

Примечательнозначительн,что усиливалобоих апоптоз путем подавления пролиферации клеток и повышения эффективности лучевой терапии за счет индукции остановки клеточного цикла (на стадиях клеточного цикла G1 и суб-G1) [11]. Также было обнаружено, что амигдалин снижает миграцию клеток MDA-MB-231 в большей степени, чем клеток MCF-7 [43]. Кроме того, было высказано предположение, что ингибирование протеолитических ферментов способствует активации апоптотических событий в клетках рака молочной железы MCF-7 [44]. Кроме того, было показано, что амигдалин увеличивает экспрессию Bax и снижает экспрессию Bcl-2 в клетках рака молочной железы SK-BR-3 и MCF-7. Однако по сравнению с конъюгатом аффитела амигдалин-ZHER2 влияние на экспрессию Bax и Bcl-2 в клетках SK-BR-3 было сильнее, чем в клетках MCF-7 [45]. Также была продемонстрирована способность амигдалина уменьшать рост клеток рака молочной железы человека MCF-7 и T47D в зависимости от концентрации путем стимуляции производства малонового диальдегида (MDA) и окисленного глутатиона . Более того, наблюдалось значительное снижение общего уровня глутатиона и активности глутатионредуктазы в клетках рака молочной железы [46].

3.2.3. Рак простаты

Амигдалин дозозависимо ингибировал рост опухоли и уменьшал опухолевые клоны в клеточных линиях рака простаты путем ингибирования фазы G0/G1 [47]. Более того, было очевидно ингибирование роста клеток рака предстательной железы и роста опухоли под действием амигдалина, что указывает на функцию метаболических ферментов бетаглюкозидазы (β-глюкозидазы) и роданезы в регулировании противораковой активности амигдалина in vivo [10]. Активацию амигдалина β -глюкозидазой можно рассматривать как стратегию ферментной/лекарственной терапии, которая может стать новым многообещающим подходом к таргетному лечению рака простаты [48]. Было также обнаружено, что воздействие амигдалина на некоторые клетки рака предстательной железы, такие как DU-145, ингибирует распространение метастазов, чему способствует интегрин α6 [49].

3.2.4. Колоректальный рак

• альтернативной и традиционной медицине амигдалин обычно используется для профилактики и лечения

злокачественных новообразований колоректальных опухолей [50]. Было обнаружено , что противораковый эффект амигдалина на клетки колоректального рака, например, на клетки колоректального рака SNU-C4 человека, усиливается за счет снижения экспрессии генов, связанных с клеточным циклом [51]. Сообщалось, что клетки рака толстой кишки более чувствительны к действию амигдалина по сравнению с нормальными клетками из-за более высокой концентрации β-глюкозидазы и более низких уровней печеночного фермента роданезы, который может превращать цианид в относительно безвредное соединение тиоцианат [52].

3.2.5. Рак шейки матки

Доказано, что амигдалин значительно ингибирует пролиферативную активность клеток рака шейки матки HeLa

• Антиапоптотический белок Bcl-2 подавлялся, а проапоптотический Bax повышался в клетках HeLa, обработанных амигдалином [22]. Более того, соотношение Bax-к-Bcl-2 и активность каспазы-3 увеличивались при обработке амигдалином в клетках HeLa, усиливая апоптотический эффект амигдалина на клетки рака шейки матки [22,53].

3.2.6. Рак желудочно-кишечного тракта

Было продемонстрировано, что амигдалин стимулирует процесс апоптоза путем повышения

экспрессии каспазы-3 и снижения экспрессии Bcl-2, а также ингибирования пролиферации

гепатоцеллюлярных раковых клеток HepG2 и EAC и повышения экспрессии Beclin-1 [54].

Примечательно , что комбинация амигдалина с метформином показала многообещающий эффект

по сравнению с монотерапии амигдалином; их комбинация была более цитотоксичной, демонстрируя

большую способность индуцировать апоптоз и останавливать клеточный цикл в гепатоцеллюлярных раковы

Было показано, что помимо этой комбинации активность амигдалина с цинком приводит к усилению апоптотического эффекта при лечении HepG2 по сравнению с действием амигдалина без цинка [56].

3.2.7. Другие злокачественные

новообразования опухолей. Ингибирующее действие амигдалина на маркеры роста и дифференцировки E- и N-кадгерин в клетках почечно-клеточного рака (ПКР) было также продемонстрировано при применении 10 г/мл амигдалина к клеточным линиям ПКР A498, Caki-1. и KTC-26 в течение 24 часов или 2 недель in vitro [35]. Исследование влияния амигдалина (1,25–10 мг/

мл) на несколько клеточных линий рака мочевого пузыря (UMUC-3, RT112 и TCCSUP) также показало положите

Наиболее заметное воздействие амигдалина связано с осью cdk2-циклин А.

Исследования по нокдауну siRNA показали положительную связь с cdk2/циклином.

Также было обнаружено, что амигдалин ингибирует развитие опухоли за счет подавления CDK2 и циклина [57]. Напротив, колониеобразующие клетки из лейкозных клеточных линий и нормального костного мозга были относительно толерантны к амигдалину и его метаболитам in vitro. Хотя наблюдалось увеличение скорости апоптоза, не наблюдалось избирательного разрушения между линиями лейкозных клеток человека и нормальными клетками костного мозга [58].

Таблица 1. Исследования, оценивающие противораковые эффекты и противораковые молекулярные механизмы амигдалина.

3.3. Токсичность амигдалина.

Чрезмерное употребление амигдалина может привести к отравлению (более 1 мг/л цианида в крови). Амигдалин превращается в глюкозу, бензальдегид и цианистый водород под действием эндогенного фермента (β-глюкозидазы) при измельчении фруктовых косточек. С более аналитической точки зрения, при высвобождении HCN цитохромоксидаза C может реагировать с ионом железа.

Это может индуцировать образование комплексов ионов металлов, которые лизуют клетки и ингибируют синтез АТФ [65].

Сообщалось, что амигдалин оказывает токсическое действие при приеме внутрь с добавками.

Пероральный прием 500 мг амигдалина может привести к высвобождению 30 мг цианида [66].

Токсичность цианидов может быть опасной для жизни из-за снижения утилизации кислорода

митохондриями, что приводит к гибели клеток. В раковых клетках отсутствует родханаза, фермент,

который действует как детоксифицирующий агент, связывая железо-серные центры на клеточных

мембранах и превращая HCN в менее токсичный метаболит – тиоцианат. Однако после парентерального

введения амигдалина/лаэтрила путем инъекции более 80% тиоцианата обнаруживалось в моче крыс и

кроликов [66]. Неблагоприятные побочные эффекты токсичности цианидов включают тахикардию,

спутанность сознания, тошноту, головную боль и, что более серьезно, нейромиопатию, цианоз, кому, судороги и с

За последние десятилетия было проведено несколько исследований in vitro и in vivo с использованием однократных или многократных доз и различных форм введения амигдалина (внутривенных и внутримышечных), которые не выявили образования HCN, что подчеркивает решающую роль кишечника в физиологии организма человека после потребление веществ. Анаэробные бактериальные типы, существующие в кишечнике, обладают высокой активностью β-глюкозидазы, которая необходима амигдалину для гидролиза HCN. Тем не менее, при определенных обстоятельствах было обнаружено, что токсичность HCN существует. В некоторых случаях токсичность была вызвана приемом различных доз амигдалина, и не было побочных эффектов HCN, связанных с высокими дозами. Несколько факторов, в том числе потребление пробиотиков или пребиотиков, диета и возраст, могут изменить кишечный консорциум, который отвечает за условия, при которых возникает токсичность. Примечательно, что не было зарегистрировано серьезных реакций на пероральный прием амигдалина

вдозе 3 г у больных раком, которые искали альтернативные методы лечения. Минимальная смертельная доза амигдалина для взрослого человека составляет 50 мг или 0,5–3,5 мг/кг массы тела. Однако взаимодействие с одновременным употреблением витамина С, по-видимому, активирует его неблагоприятные.

3.4. Клинические исследования амигдалина/лаэтрила при злокачественных новообразованиях опухолей человека в 20 веке

Несколько исследований продемонстрировали противораковую активность амигдалина и его

терапевтическое использование для лечения рака и облегчения боли [30,68]. Хотя научные

доказательства противоракового эффекта амигдалина, основанные на клинических испытаниях,

ограничены, было проведено несколько исследований по изучению влияния амигдалина на злокачественные оп

На протяжении многих лет рассматривалось несколько клинических испытаний комбинации амигдалин/

лаэтрил [32]. В 1980 году отдел исследований лекарственных средств Национального института рака

(NCI) объявил, что около 200 больных раком, «для которых никакое другое лечение не было эффективным», планировалось получить химическое вещество, специальную диету и дополнительные витамины (см . Институт начинает клинические испытания лаэтрила», 1980) [69]. В течение следующих двух лет были проведены два клинических исследования в области применения лаэтрила при раке человека. Первое из этих двух клинических испытаний было проведено в 1981 году на шести пациентах

• поздней стадией рака [32]. Амигдалин вводили как внутривенно, так и перорально в течение 21 дня без признаков токсических реакций. Эти данные согласуются с предыдущими наблюдениями за пациентом после самостоятельного приема лаэтрила [70]. В 1982 году было проведено еще одно клиническое исследование с участием 178 пациентов с раком, которые получали лечение амигдалином плюс «метаболическую терапию» [59]. Никаких существенных преимуществ с точки зрения излечения, улучшения или стабилизации рака, улучшения симптомов, связанных с раком, или увеличения продолжительности жизни не наблюдалось. Опасность терапии амигдалином у нескольких пациентов была подтверждена симптомами токсичности цианида или уровнями цианида в крови, приближающимися к летальному уровню [59,69,70]. Однако следует отметить, что эти клинические испытания были проведены более 40 лет назад и теперь их следует считать устаревшими, что подчеркивает необходимость проведения новых клинических испытаний, включающих введение амигдалина в различных фармацевтических формах, которые могли бы быть более переносимыми и приемлемыми для организм человека, демонстрируя большую биоактивную эффективность и нетоксичные эффекты.

3.5. Наночастицы и амигдалин в 21 веке Наночастицы считаются

многообещающим биотехнологическим методом доставки лекарств и лечения злокачественных опухолей человека, избегая при этом токсичности. Несколько исследований на линиях раковых клеток человека продемонстрировали положительные результаты в отношении метаболизма амигдалина без побочных эффектов. Как уже упоминалось, амигдалин, несмотря на его противораковое действие, столкнулся с противоречиями из-за выделения цианида. Сохаил и Аббас исследовали наночастицы альгината-хитозана (ACNP) как способ введения лекарств посредством инкапсуляции и доставки амигдалина в опухолевые клетки (H1299) [64]. Наночастицы продемонстрировали стабильное высвобождение лекарственного средства в течение десяти часов и значительную скорость набухания в слабокислой и нейтральной среде. Было показано, что ACNP оказывают большее противоопухолевое действие на клеточные линии H1299, чем свободный амигдалин, что предполагает большее поглощение клетками соединения, инкапсулированного в наночастицы. В связи с этим биомиметические и биосовместимые наночастицы бальгината-хитозана могут быть использованы в качестве выгодной системы доставки лекарств для пролонгированной и контролируемой доставки амигдалина с повышенной цитотоксической активностью в отношении опухолевых клеток, одновременно защищая нормальные ткани человека и здоровые клетки [64].

Наночастицы серебра, инкапсулирующие амигдалин и сшивающие микрокапсулы, заряженные хитозаном, также были исследованы в клеточных линиях рака молочной железы. Противораковый ответ также наблюдался в рамках контролируемого высвобождения амигдалина за счет соединения хитозана, преодолевающего низкие цитотоксические эффекты при высоких дозах [63].

Кроме того, наночастицы продемонстрировали устойчивое высвобождение амигдалина и фолиевой кислоты и очевидную селективность в отношении клеток путем подавления роста опухоли. В то же время было обнаружено, что они повышают эффективность лучевой терапии за счет усиления апоптоза, блокирования клеточного цикла и уменьшения пролиферации клеток рака молочной железы за счет

снижения уровня железа и митоген-активируемых протеинкиназ (MAPK/P38). Также была показана амигдалин-фолиев

ингибировать дифференцировку экспрессии комплекса CD4 и CD80, вызывая подавление трансформации фактора роста бета (TGF-бета)/интерлейкин-6, (IL-2)/интерферон-гамма, (INF-g)/интерлейкин-2, и Экспрессия (IL-2)/фактора роста эндотелия сосудов (VEGF) на сигнальном пути при одновременной модуляции экспрессии гена CD8 и группы естественных киллеров 2D [11].

Мосайеби и его коллеги создали наноформулу амигдалина с β-циклодекстрином, чтобы исследовать усиление его действия против миграции клеточной линии MCF-7, апоптоза и миграции генов. Наноформулированный амигдалин показал больший эффект на опухолевые клетки, чем один амигдалин [62].

3.6. Пищевые добавки с амигдалином для лечения рака Амигдалин, лаэтрил

или витамин B17 с 1845 года заявлялись в качестве средства для лечения различных заболеваний, особенно злокачественных опухолей [33]. Однако в 1982 году возникло мнение, что амигдалин может быть токсичным препаратом и неэффективен при лечении рака [59].

Недавние теоретические и практические разработки показали, что амигдалин может оказывать благотворное воздействие на больных раком [28,62,63]. Амигдалин использовался для лечения рака как в виде монотерапии, так и в сочетании с метаболической терапией. Поэтому стоит отметить, что токсичность витаминных добавок не является редким явлением, и амигдалин рекомендуется пациентам в качестве пищевой добавки при раке, при этом предлагаются высокие дозы [71]. Таблетки и капсулы амигдалина в настоящее время продаются как натуральная пищевая добавка под неправильным названием лаэтрил или сомнительным названием «витамин B17» [72].

Некоторые исследования клинических случаев продемонстрировали рецидив метаболического ацидоза после массивной передозировки амигдалина и опасной для жизни токсичности цианидов, включая нефрогенный несахарный диабет [73–76]. Токсичность амигдалина может быть вызвана ядовитым составным продуктом бензальдегида и цианида после перорального приема [35]. Как токсикологи, так и нефрологи должны знать о способности этого «витамина» вызывать отравление цианидами [ 77]. Кроме того, в настоящее время существует серьезная обеспокоенность тем, что натуральные пищевые добавки не подвергаются строгим аналитическим и клиническим испытаниям. В соответствии с Регламентом Европейского Союза ((EC)

• 178/2002), касающимся общего законодательства в области пищевых продуктов, пищевые добавки считаются пищевыми продуктами, а не лекарственными средствами [78]. Согласно приведенным выше данным, предполагающим, что клиническое использование пищевых добавок амигдалина может сопровождаться неблагоприятными побочными эффектами, соотношение риска и пользы не является благоприятным д Более того, амигдалин ошибочно называют витамином B17; соединение не является витамином [36].

1. Дискуссия

 альтернативной медицине амигдалин уже несколько десятилетий считается противораковым средством без строгого научного подтверждения его эффективности и безопасности. Несколько тематических исследований выявили риск плохо регулируемых добавок [79]. Недавние исследования in vitro продемонстрировали, что амигдалин может оказывать противораковую активность, влияя на клеточный цикл, способствуя апоптозу и цитотоксичности, а также модулируя иммунный ответ [29,80,81].

Однако клинические исследования показали, что метаболиты амигдалина могут превращаться в синильную

кислоту и что накопление синильной кислоты с течением времени может привести к неблагоприятному токсическому эффекту у человека [82].

Более того, доступные в настоящее время исследования имеют некоторые ограничения. На сегодняшний день проведено лишь несколько исследований на животных in vivo . Кроме того, результаты исследований противоречивы, возможно, из-за неоднородности конструкции их методов. Доза, форма вещества, тип введения, отсутствие РКИ на людях, а также отсутствие клинических испытаний фазы III и IV являются существенными ограничениями для рекомендаций по назначению амигдалина для профилактики и/или лечения рака в клинической практике. Таким образом, преимуществом нашей обзорной статьи является выявление пробела в литературе относительно проведения клинических исследований амигдалина. С другой стороны, до сих пор недостаточно надежных данных о биодоступности амигдалина и соответствующих уровнях его концентрац

циркуляция. Соответственно, не существует данных о том, можно ли использовать амигдалин в качестве совместного лечения с другими химиотерапевтическими средствами.

Значительный научно-исследовательский разрыв между концом 20-го века и началом 21-го века возник из-за того, что до сих пор исследовательская деятельность проводилась ограниченно . Более того, большинство исследований, подтверждающих противораковое действие амигдалина, было проведено на различных линиях раковых клеток in vitro. Таким образом, разумно предположить, что его противораковые эффекты не могут быть экстраполированы на человека. Противоречивые результаты исследований in vitro и in vivo [41,51,60,83–86] и нескольких клинических исследований [61] еще раз подчеркивают необходимость дополнительных исследований

• области терапии рака, особенно связанных с изучением новую, нетоксичную формулу амигдалина, принимая во внимание роль нанотехнологий в современную эпоху биомедицинской науки. В целом, существует большая потребность в дальнейших исследованиях на животных in vivo , а также клинических исследованиях на людях для изучения потенциальной эффективности профилактики и/или лечения амигдалина против развития и прогрессирования раковых заболеваний. Кроме того, расхождения, обнаруженные в некоторых клинических исследованиях, могут быть связаны с небольшими размерами выборки, а также с различными персонализированными характеристиками участников , что подчеркивает необходимость проведения хорошо спланированных клинических исследований с адекватными размерами выборки в будущем.

• 2015 году Кокрановская база данных систематических обзоров заявила, что лаэтрил или амигдалин оказывают благоприятное воздействие на больных раком, что в настоящее время не подтверждается научно обоснованными клиническими данными [28]. В приведенном выше отчете документально подтверждено, что существует значительный риск серьезных побочных эффектов от отравления цианидом после введения лаэтрила или амигдалина, особенно после перорального приема

• Таким образом, баланс риска и пользы лаэтрила или амигдалина для лечения рака остается однозначно сомнительным [28]. Однако с 2015 года было проведено много исследований. Более того, Национальный институт рака сообщил, что частота отравлений цианидами намного выше при пероральном приеме лаэтрила, поскольку кишечные бактерии и некоторые часто употребляемые в пищу растения содержат ферменты (бета-глюкозидазы), которые активируют высвобождение цианида после при

Наконец, эффективно применяя последние разработки в процессах разработки лекарств, амигдалин можно использовать в качестве ведущего соединения для синтеза и разработки более биологически активных аналогов, родственных амигдалину, с более высокой эффективностью и целевой селективностью, а также со сниженными нежелательными побочными эффектами и улучшенной биодоступностью при пероральном приеме. Например, в последние годы методы машинного обучения произвели революцию в области разработки лекарств на основе структуры [88].

Подходы искусственного интеллекта для ускорения и предотвращения сбоев в разработке лекарств также могут быть применены в случае амигдалина [89]. Помимо методов машинного обучения и искусственного интеллекта, квантовые вычисления являются еще одним значительным достижением

• области технологий генеративной химии и процессов открытия лекарств, которые исследователи

могут использовать в случае амигдалина [90]. Функционализация на поздней стадии также создает новые проблемы для введения новых групп химических фрагментов, таких как амигдалин и его будущие потенциальные синтетические аналоги, ближе к концу синтетической последовательности, что означает, что новые молекулы, к которым можно быстро получить доступ без трудоемких химических процессов de novo. синтез [91]. Этот конкретный подход может предложить такие преимущества, как эффективный доступ к разнообразным библиотекам для изучения взаимосвязей структура-активность и улучшение физико-химических и фармакокинетических свойств [91].

Компьютерное открытие лекарств также может обеспечить быструю идентификацию весьма разнообразных, мощных, селективных по мишеням и подобных лекарству лигандов белков, открывая новые возможности для экономически эффективной разработки более безопасных и эффективных низкомолекулярных методов лечения, таких как амигдалин . 92]. Липофильность и биомиметические свойства также играют важную разную и перекрывающуюся роль в поддержке процесса открытия лекарств, главным образом за счет увеличения пероральной биодоступности потенциальных лекарств и значительного снижения их потенциальных неблагоприятных побочных эффектов [93,94]. Липофильность имеет уникальную ценность на ранних этапах разработки лекарств для скрининга библиотек и для первоначальной идентификации перспективных соединений, в то время как биомиметические свойства полезны для экспериментальной оценки свойств абсорбции, распределения, метаболизма и выведения (ADME) синтезированных новых соединений. поддержка определения приоритетности потенциальных лекарств и руководство дальнейшим синтезом; эти подходы могли бы

могут быть применены в случае амигдалина для получения новых синтетических аналогов амигдалина с повышенной пероральной биодоступностью и уменьшенными нежелательными побочными эффектами [93,94].

• поддержку вышеизложенных соображений недавно были применены модели двойного докинга и молекулярной динамики для разработки новых подходов к объяснению влияния амигдалина на динамическое поведение комплекса Bcl-2/BAX, каспазы-3 и PARP- 1 . 95]. Эти молекулярные мишени могут играть определяющую роль в путях апоптоза и могут рассматриваться как потенциальные терапевтические мишени для лечения рака [95]. В целом, эти компьютерные наблюдения можно считать хорошим доказательством отказа от убеждения, что цианогруппа амигдалина, которая является основной группой, ответственной за противораковую активность амигдалина [95], может быть заменена другой химической группой с меньшими побочными эффектами. [96,97]. Кроме того, результаты вычислений подтвердили, что амигдалин имеет уникальную структуру и может считаться эталонным соединением для разработчиков лекарств

при разработке новых молекул со схожими эффективными противораковыми химическими структурами, но с меньшими неблагоприятными побочными эффектами [95–97].

1. Выводы

• настоящее время имеется несколько линий данных in vitro , свидетельствующих о том, что

амигдалин и его синтетический аналог лаэтрил обладают противораковыми свойствами, а предыдущие и предстоящие исследования на животных in vivo , по-видимому, подтверждают их противораковые свойства. Однако существуют определенные возникающие и серьезные проблемы, связанные с их токсичностью из-за их цианогруппы, а также из-за плохой биодоступности при пероральном приеме. В связи с этим необходимо эффективно применять новые технологии при разработке лекарств, чтобы свести к минимуму их неблагоприятные побочные эффекты, а также повысить их пероральную биодоступность. В связи с этим химики-медики должны сосредоточиться на лабораторном синтезе химических аналогов, которые могли бы поддерживать противораковую активность амигдалина, одновременно снижая его неблагоприятные побочные эффекты. Технология наночастиц кажется многообещающей для увеличения биодоступности и противораковой активности амигдалина при одновременном снижении его токсических эффектов. Однако в литературе существует значительный пробел, касающийся проведения клинических испытаний по изучению его противораковой активности на людях и обеспечению безопасности амигдалина до его внедрения в клиническую практику. Сочетание технологии наночастиц с использованием новых и более безопасных синтетических аналогов амигдалина.

переведено с английского Said-lab.com

Доктор Амира Альнур, Int. Журнал фармацевтических наук и медицины (IJPSM),

выпуск 2. 10 октября 2017 г., с. 8-14

Профилактическая роль амигдалина при плоскоклеточном раке Клеточная карцинома, индуцированная у хомяков

Доктор Амира Альнур, доктор

философии. Преподаватель

патологии полости рта, ассистент кафедры патологии полости рта, Сирийский частный университет. Электронная почта: dr.amieranour@gmail.com, номер телефона: 00963988126576

Абстрактный:

Предыстория и цель исследования:

Плоскоклеточный рак полости рта (ПКРП) составляет 95% всех форм рака головы и шеи. В последние годы разработка противоопухолевых препаратов постепенно трансформировалась от цитотоксических препаратов к разработке новых таргетных препаратов с низкой токсичностью и высокой специфичностью. Амигдалин извлекается из косточек горького абрикоса и используется для лечения многих видов рака. Амигдалин считается натуральным продуктом, обладающим противоопухолевой активностью, меньшим количеством побочных эффектов и широко используемым. В этом исследовании мы исследуем профилактическую роль амигдалина при плоскоклеточном раке, индуцированном в буккальном мешке хомяков, путем обнаружения его корреляции с основными белками клеточного цикла и апоптоза (P53 и BCL2 соответственно).

Материалы и методы:

30 хомяков инкубировали и лечили амигдалином перорально, попеременно с канцерогенным агентом (ДМБА), в течение 3,5 месяцев. Затем хомяков умерщвляли, и мы готовили буккальный мешочек для традиционного и иммуногистохимического окрашивания, используя P53 и BCL2.

Полученные результаты:

Возникла карцинома с задержкой. В течение 3,5 мес наблюдался только вариант диспластических изменений. Кроме того, обнаружено снижение экспрессии маркеров клеточного цикла и апоптоза (P53 и BCL2) в образцах, обработанных амигдалином.

Заключение:

Амигдалин играет профилактическую роль в отношении плоскоклеточного рака полости рта, вызванного у хомяков. Он выполняет эту роль, контролируя основные белки, связанные с клеточным циклом и апоптозом (P53 и BCL2 соответственно).

Введение:

Злокачественные опухоли являются основным заболеванием, наносящим серьезный ущерб здоровью человека, и Всемирной организацией здравоохранения они были внесены в список серьезно угрожаемых здоровью человека. (1).

Поэтому лечение этой карциномы, как и других видов рака, с помощью таких традиционных методов лечения или дополнительных и альтернативных подходов, которые широко распространяются, представляет собой сложную задачу. (2)

(3) (4) (5).

Лаэтрил (амигдалин) также является важным примером альтернативной терапии рака и связан с цианогенными гликозидами, полученными из ядер различных фруктов (миндаля, абрикосов, персиков и т. д.). Это натуральный продукт, обладающий противоопухолевой активностью и меньшим количеством побочных эффектов. Это перспективный противоопухолевый препарат в сочетании с условно-хирургической терапией и химиотерапевтическими препаратами (6, 7).

Все больше данных подтверждают противораковое действие амигдалина и его избирательное убивающее действие на раковые клетки (8) (9) (10) (11).

Амигдалин также можно использовать для лечения рака и облегчения боли (8, 12, 13) (14) (15).

Материалы и методы:

Дизайн исследования:

• этом исследовании приняли участие 30 золотых сирийских хомяков. Мы индуцировали SCC в буккальном мешочке три дня в неделю, взаимозаменяемо с пероральным приемом амигдалина (200 мг). Это исследование длилось 3,5 месяца — время, необходимое для индукции плоскоклеточного рака в буккальном мешке. Всех хомяков забили через 3,5 месяца. Для гистопатологического исследования мы подготовили традиционные и иммуногистохимические красители.

Экспериментальное исследование проводилось в инкубаторах для животных фармацевтического факультета Дамасского университета. Подготовка образцов и методы окрашивания проводились в лаборатории патологии полости рта стоматологического факультета Дамасского университета.

Расчет размера выборки:

• соответствии с текущими требованиями исследования был предложен минимальный размер выборки в 30 хомяков, демонстрирующий 2,5-кратное увеличение. Этот расчет установил мощность теста на уровне 80% и уровень значимости на уровне 5%.

Материалы:

Амигдалин: амигдалин от компании «Терезия» применялся перорально в концентрации, достигающей 200 мг/кг.

Канцерогенный агент: мы использовали ДМБА, полициклический ароматический углеводородный канцероген, наносили его на слизистую оболочку щечной сумки молотков с помощью малярной кисти в течение трех с половиной месяцев.

Окрашивание: Мы использовали традиционные атласы (гематоксилин и эозин). В дополнение к иммуногистохимическим окраскам; P53 и BCL2 от американской компании Bio-SB.

Методы:

ДМБА наносили на левый щечный мешочек хомяка с помощью малярной кисти в течение трех с половиной месяцев.

Это предлагаемый период времени для индукции плоскоклеточного рака в рамках этого метода.

Амигдалин был приготовлен для перорального применения в дозе 200 мг/кг.

Хомяков забивали всех вместе через 3,5 месяца.

Образцы готовили для традиционного и иммуногистохимического окрашивания.

Классификация повреждений эпителия была разделена на 7 категорий: нормальный эпителий (значение 0), гиперплазия (значение 1), гиперплазия и дисплазия (значение 2), легкая дисплазия (значение 3), умеренная дисплазия (значение 4) и тяжелая дисплазия (значение 4). значение 5)

Статистика:

Мы использовали Т-тест Стьюдента для двух отдельных групп, чтобы сравнить экспрессию P53 и BCL2 в разные периоды времени применения препарата, и тест хи-квадрат, чтобы сравнить разницу между частотами положительной экспрессии иммуногистохимических окрасок и между частотами нормальных образцов легких и воспаленных.

Полученные результаты:

• некоторых образцах эпителия буккального мешка выявлены гиперпластические и диспластические изменения (24 случая), тогда как в других образцах (6 случаев) выявлена норма.

Влияние амигдалина на частоту изменений внутри эпителия. Для изучения достоверности различий

между частотами нормального эпителия и диспластического эпителия мы использовали критерий хи-квадрат (таблица 1).

Как показано в таблице 1, наблюдались достоверные изменения между частотами нормальных эпителиальный и диспластический (Р=0,005).

Результаты экспрессии иммуногистохимических окрасок: (таблица 2)

Влияние амигдалина на частоту иммуногистохимических окрасок:

Мы использовали критерий хи-квадрат для изучения значимости различий между частотами экспрессия иммуногистохимических окрасок: (таблица 3)

Никакой значимости между частотой отрицательных и положительных образцов для BCL2 ( P

= 0,796) и для P53 (P = 0,439).

Мы использовали Т-тест Стьюдента для изучения значимости различий между (0) и значениями экспрессии BCL2 и P53. (таблица 4)

• этой таблице показаны различия значимости, которые были продемонстрированы между стандартным значением

• и средними значениями положительных экспрессий в отношении двух исследованных белков (BCL2 и P53) при уровне достоверности 95 процентов (значение P <0,05). Положительный знак разницы указывает на то, что значения экспрессии белков были выше стандартного значения (0) в группе, получавшей амигдалин.

Обсуждение:

• этом исследовании мы обнаружили роль амигдалина, экстрагированного из косточек абрикоса, в качестве профилактического препарата плоскоклеточного рака, индуцированного в буккальном мешке хомяков. Амигдалин состоит из двух молекул глюкозы, одной единицы бензальдегида и синильной кислоты (HCN). Бензальдегид и синильная кислота обладают противоопухолевыми свойствами. Амигдалин использовался для лечения различных типов рака (9-11, 16-20).

• этом исследовании амигдалин, который применялся перорально в дозе 200 мг/кг в течение 3,5 месяцев, значительно подавлял начало развития плоскоклеточного рака у хомяков (15, 21, 22).

Изучая обзоры литературы, мы не обнаружили предыдущих исследований о профилактической роли амигдалина при плоскоклеточном раке или других видах рака.

Новые исследования подтвердили роль этого препарата в лечении различных видов рака человека. Его роль была связана с понижением регулируемого эффекта таких белков, как BCL2 (апоптозный белок) и повышением экспрессии BAX (антиапоптический белок). (6, 9, 11, 18, 20, 22-25).

Заключение:

Что касается злокачественных опухолей и их лечения, исследования сегодня направлены на таргетную терапию, а не на традиционные методы лечения. Дополнительные исследования и исследования должны принять во внимание эту точку зрения. Кроме того, более важно иметь возможность предотвращать возникновение подобных заболеваний среди лиц, имеющих склонность к развитию таких злокачественных новообразований.

В заключение следует отметить, что Амигдлайн заслуживает дальнейшей оценки своей профилактической роли.

Использованная литература:

1. Ллевеллин К.Д., Джонсон Н.В., Варнакуласурия К.А. Факторы риска плоскоклеточного рака полости рта у молодых

людей: комплексный обзор литературы. Оральная онкология. [Исследовательская поддержка, за пределами США

Правительственный обзор]. Июль 2001 г.;37(5):401-18.

2.Асили С., Фатхи Казеруни А., Агагазвини Л., Салигх Рад Х.Р., Пираеш Исламиан Дж. Магнитно-резонансная томография

• динамическим контрастом (DCE-MRI) и диффузионно-взвешенная магнитно-резонансная томография (DWI) для дифференциации доброкачественных и злокачественных опухолей слюнных желез. Журнал биомедицинской физики и инженерии. Декабрь

2015 г.;5(4):157-68.

Чанг Х.К., Ли Дж.В., Ким Ю.С., Ким Х., Ли М.Х. и др. Амигдалин подавляет 3. индуцированную липополисахаридом экспрессию

циклооксигеназы-2 и индуцибельной синтазы оксида азота в клетках микроглии мыши BV2. Нейрол Рез. [Поддержка сравнительных

исследований, правительство за пределами США]. 2007;29

Приложение 1:S59-64.

Боларинва И.Ф., Орфила С., Морган М.Р. Разработка и применение 4. иммуноферментного анализа (ИФА) для количественного определения амигдалина, цианогенного гликозида, в пищевых продуктах. J Agric Food Chem. 9 июля 2014 г.;62(27):6299-305.

Боларинва И.Ф., Орфила С., Морган М.Р. Содержание амигдалина в семенах, ядрах и пищевых продуктах 5.

коммерчески доступен в Великобритании. Пищевая хим. 2014;152:133-9.

1. Сонг З, Сюй С. Расширенные исследования противоопухолевого действия амигдалина. J Рак Res Ther. [Исследовать

Поддержка, Обзор правительства за

пределами США]. 10 августа 2014 г. Приложение 1:3–7.

Корман ДБ. Альтернативные средства лекарственной терапии рака: летрил. Вопр Онкол. [Обзор]. 7. 2012;58(5):698-704. 8.

Чанг Х.К., Шин М.С., Ян ХИ, Ли Дж.В., Ким Ю.С., Ли М.Х. и др. Амигдалин индуцирует апоптоз посредством регуляции экспрессии Bax и Bcl-2 в клетках рака простаты человека DU145 и LNCaP. Биол Фарм Булл. [Исследовательская поддержка, правительство за пределами США]. 2006 августа;29(8):1597-602.

Ли Х.М., Мун А. Амигдалин регулирует апоптоз и адгезию в тройной негативной молочной железе Hs578T 9.

Раковые клетки. Биомол Тер (Сеул). Январь 2016 г.;24(1):62-6.

1. Макаревич Дж., Рутц Дж., Юнгель Э., Каульфус С., Цаур И., Нельсон К. и др. Амигдалин влияет на адгезию и инвазию клеток рака мочевого пузыря in vitro. ПлоС один. [Исследовательская поддержка, правительство за пределами США]. 2014;9(10):e110244.

1. Чен Ю, Ма Дж, Ван Ф, Ху Дж, Цуй А, Вэй С и др. Амигдалин индуцирует апоптоз в клетках линии клеток рака шейки матки человека HeLa. Иммунофармакол Иммунотоксикол. [Исследовательская поддержка, правительство за пределами США]. Февраль 2013

г.;35(1):43–51.

1. Здроевич З., Отлевска А., Хакемер П. [Амигдалин - структура и клиническое значение]. Пол

Меркур Лекарски. Май 2015 г.;38(227):300-3.

Ли Х., Накашима Т., Танака Т., Чжан Ю.Дж., Ян С.Р., Куно И. Два новых мальтольных гликозида и 13 цианогенных гликозидов из Elsholtzia Rugulosa Hemsl. J Nat Med. Январь 2008 г.;62(1):75-8.

1. Боларинва И.Ф., Орфила С., Морган М.Р. Определение амигдалина в семенах яблок, свежих яблоках и переработанных яблочных соках. Пищевая хим. 1 марта 2015 г.; 170: 437-42.

Бромли Дж., Хьюз Б.Г., Леонг Д.К., Бакли Н.А. Опасное для жизни взаимодействие между 15. дополнительными лекарствами: токсичность цианидов после приема амигдалина и витамина С. Анналы фармакотерапии. Сентябрь 2005 г.; 39 (9): 1566-9.

1. Ли Н, Чен X, Ляо Дж, Ян Г, Ван С, Джозефсон Ю и др. Ингибирование 7,12-

диметилбенз[а]антрацен (ДМБА)-индуцированный оральный канцерогенез у хомяков чаем и куркумином.

Канцерогенез. [Исследовательская поддержка, правительство США, PHS]. 2002 августа;23(8):1307-13.

1. Ха У.С., Бэ В.Дж., Ким С.Дж., Юн Б.И., Хон Ш., Ли Дж.И. и др. Антоцианин индуцирует апоптоз клеток DU-145 in vitro и ингибирует

рост ксенотрансплантата рака простаты. Медицинский журнал Йонсей. [Исследовательская поддержка, правительство за пределами США]. Январь 2015 г.;56(1):16–23.

Пак Х.Дж., Юн С.Х., Хан Л.С., Чжэн Л.Т., Юнг К.Х., Ум Ю.К. и др. Амигдалин ингибирует гены, связанные с клеточным

циклом в клетках рака толстой кишки человека SNU-C4. Мир Дж Гастроэнтерол. [Исследовательская поддержка, правительство за пределами США].

• сентября 2005 г.; 11 (33):

Цянь Л., Се Б., Ван Й., Цянь Дж. Опосредованное амигдалином ингибирование клеток немелкоклеточного рака легких 5156-61. 19. Инвазия in vitro. Международный журнал клинической и экспериментальной патологии. 2015;8(5):5363-70.

1. Юнгель Э., Томас А., Рутц Дж., Макаревич Дж., Цаур И., Нельсон К. и др. Амигдалин подавляет рост

клеток почечно-клеточного рака in vitro. Int J Mol Med. Февраль 2016 г.;37(2):526-32.

1. Адевуси С.Р., Оке О.Л. О метаболизме амигдалина. 1. ЛД50 и биохимические изменения у крыс. Канадский журнал физиологии

• фармакологии. Сентябрь 1985 г.;63(9):1080-3.

1. Чанг Л.В., Чжу Х.П., Ли В.Б., Лю ХК, Чжан QS, Чэнь Х.Б. Защитное действие амигдалина на альвеолярные эпителиальные клетки II типа, подвергнутые гипероксии, выделенные из легких недоношенных крыс in vitro. Чжунхуа эр ке за чжи Китайский педиатрический журнал. [Исследовательская поддержка, правительство за пределами США]. 2005 февраль;43(2):118-23. 23.

Хён-Гён ЧАН М-СС, Хе-и др. Амигдалин индуцирует апоптоз посредством регуляции Bax Экспрессия Bcl-2 в клетках рака простаты человека DU145 и LNCaP. Биол Фарм. 2006.

Журнал стоматологических и медицинских наук IOSR (IOSR-JDMS)

электронный ISSN: 2279-0853, p-ISSN: 2279-0861. Том 15, выпуск 2, версия. IX (февраль 2016 г.), стр. 75–79, www.iosrjournals.org.

Эффект амигдалина при лечении плоскоклеточного рака

индуцированный в буккальном мешке золотого сирийского хомяка

Амира Нур, доктор медицинских наук, магистр наук

1 Базель Азар, доктор медицинских наук, магистр наук

2 Анас Рабата, доктор медицинских наук, магистр наук

3 Проф.Ахмад Манадили, доктор медицинских наук, магистр, доктор философии

4 Кафедра патологии полости рта Дамасского университета

1Кафедра челюстно-лицевой хирургии Дамасского университета

2 Институт стоматологии и стоматологии Университета Палацкого

2 Кафедра патологии полости рта Дамасского университета

3 Кафедра оральной гистологии Масариковского университета

3 Кафедра патологии полости рта Дамасского университета

В последнее время научные исследования сосредоточились на альтернативной и комплементарной медицине как широко распространенном методе лечения многих заболеваний, включая рак. Рак, который считается опасным для жизни заболеванием, поражает пациентов во всем мире. Традиционная медицина до сих пор не обеспечивает пациентам окончательного и абсолютного решения их страданий, особенно в терминальных случаях рака. Многие люди используют альтернативные и естественные методы, чтобы максимально уменьшить боль и побочные эффекты этой ужасной болезни. Амигдалин, извлеченный из семян абрикоса и миндаля, обсуждается как настоящее лекарство от рака и многих других заболеваний. Поэтому с помощью этого исследования мы хотели оценить эффективность амигдалина в лечении плоскоклеточного рака, наиболее распространенной карциномы полости рта, индуцированной у сирийского хомяка, и определить, каким образом это вещество останавливает раковые клетки.

Материалы и методы:20 хомяков были разделены на две группы: группу больных (10 хомяков), которую лечили амигдалином, и контрольную группу (10 хомяков), которая не получала никакого лечения. Использованный канцерогенный материал представлял собой (DMPA), а иммуногистохимические пятна - P53 и Ki67.

Результаты и выводы:Существует значительная статистическая разница между двумя группами как для P53, так и для Ki67. В заключение отметим, что амигдалин оказывает терапевтический эффект при лечении плоскоклеточного рака, индуцируя апоптоз раковых клеток.

Ключевые слова:Плоскоклеточный рак, Амигдалин, альтернативная терапия, сирийский хомяк, клеточный цикл, P53, Ki67.

Введение:

Злокачественные опухоли являются основными заболеваниями, наносящими серьезный вред здоровью человека.

Всемирная организация здравоохранения (ВОЗ) включила его в список основных заболеваний, представляющих серьезную угрозу здоровью человека.

Плоскоклеточный рак полости рта (OSCC) составляет 95% всех форм рака головы и шеи и более.

за последнее десятилетие его заболеваемость возросла на 50%. Канцерогенез полости рта представляет собой многостадийный процесс, который одновременно включает предраковые поражения, инвазию и метастазирование. Деградация клеточного цикла и пролиферация злокачественных клеток приводит к утрате механизмов контроля, обеспечивающих нормальную функцию тканей (1).

Плоскоклеточная карцинома головы и шеи (SCCHN) возникает в результате множественных молекулярных событий, вызванных воздействием различных привычек, таких как табакокурение и употребление алкогольных напитков, под влиянием факторов окружающей среды, возможно, в некоторых случаях вирусов, на фоне наследственной резистентности или восприимчивости. Плоскоклеточный рак полости рта имеет аналогичную этиологию. Генетические повреждения затрагивают многие хромосомы и гены, включая онкогены и гены-супрессоры опухолей, и именно накопление таких генетических повреждений, возможно, наряду с нарушением способности восстанавливать эти повреждения (в некоторых случаях это наследственный признак), по-видимому, приводит к карциноме у в некоторых случаях, иногда через клинически очевидное предраковое или потенциально злокачественное поражение. В этом сообщении рассматриваются достижения в понимании этой сложной и быстро развивающейся области исследований за последнее десятилетие (2).

Плоскоклеточный рак полости рта (ПКР) считается первично локализованным заболеванием, отдаленные метастазы встречаются нечасто. В литературе сообщается о растущем количестве сообщений о случаях, связанных с необычными участками отдаленных метастазов карциномы полости рта. Вероятно, это связано с улучшением контроля над раком в первичном очаге, что увеличивает вероятность развития отсроченного метастазирования. В одной статье представлен случай 58-летней женщины, которая отказалась от хирургического лечения по поводу очень агрессивного ПКР альвеолярного гребня нижней челюсти. Опухоль не ответила на химиотерапию или лучевую терапию, и у пациента появились метастазы в черепные кости примерно через 1 год после первоначального диагноза. Расположение первичной опухоли (рядом с костью), а также отказ пациента от предложенного лечения могли привести к гематологическому распространению злокачественных клеток, что привело к отдаленному метастазированию (3).

• настоящее время многие исследования показывают, что 4-6% случаев рака полости рта возникают в возрасте моложе 40 лет. При изучении факторов риска в этой возрастной группе было отмечено, что они не связаны с курением или употреблением алкоголя, которые составляют основные факторы риска в старших возрастных группах. Предполагается, что предрасположенность к генетической

нестабильности является вероятной причиной (4).

Плоскоклеточный рак головы и шеи (HNSCC) — заболевание людей среднего и пожилого возраста. Однако в последнее время сообщалось о повышении заболеваемости HNSCC у молодых людей в возрасте до 45 лет. В нашем поиске литературы мы сосредоточились на эпидемиологии и этиологии HNSCC у взрослых в возрасте до 45 лет.

HNSCC у молодых людей связан с более высоким уровнем заболеваемости среди некурящих, более низким соотношением женщин и мужчин, более высоким процентом опухолей полости рта и ротоглотки и меньшим количеством вторичных первичных опухолей. Однако, помимо традиционных факторов риска, связанных с употреблением табака и алкоголя, причины возникновения этих видов рака у молодых людей остаются неясными. Агенты, которые могут способствовать риску, включают инфекцию подтипами вируса папилломы человека высокого риска, а также генетические факторы или статус иммунодефицита. Ожидаемый рост заболеваемости и смертности среди молодых людей с HNSCC может стать серьезной проблемой общественного здравоохранения, если текущие тенденции сохранятся, особенно образ жизни, который может способствовать развитию этого заболевания (5).

Исследование вируса папилломы человека и его экспрессии в нормальной слизистой оболочке полости рта и некоторых заболеваниях полости рта показало, что вирус папилломы человека все чаще выявляется в нормальной слизистой оболочке полости рта, доброкачественной лейкоплакии, интраэпителиальной неоплазии, плоскоклеточной карциноме и бородавчатой карциноме. Он выявлялся при плоскоклеточном раке полости рта значительно чаще в исследованиях, в которых использовался анализ с высокой чувствительностью (полимеразная цепная реакция), чем в исследованиях, в которых использовались анализы с умеренной чувствительностью (например, Саузерн-блот-гибридизация) и анализы с низкой чувствительностью (например, иммуногистохимия, гибридизация in situ). ). ДНК вируса папилломы человека значительно чаще обнаруживалась в замороженной плоскоклеточной карциноме полости рта, чем в ткани, залитой в парафин. В исследованиях, в которых анализировалось использование химических кофакторов, употребление табака и алкоголя чаще ассоциировалось с плоскоклеточным раком полости рта, чем с наличием вируса папилломы человека. Однако разница не была существенной. Генотипы вируса папилломы человека высокого риска имеют значительную связь с плоскоклеточным раком полости рта (6).

Мутация, дезактивация и нарушение регуляции экспрессии онкогенов и генов-супрессоров опухолей могут быть участвует в патогенезе плоскоклеточного рака полости рта (SCC). Деактивация гена-супрессора опухолей р53 обеспечивает пролиферацию клеток и блокирует апоптоз злокачественных кератиноцитов полости рта. Мутация онкогена ras приводит к постоянной митогенной передаче сигналов. Повышенная экспрессия c-Myc в присутствии факторов роста обеспечивает дополнительный пролиферативный сигнал. Утрата функции гена-супрессора опухолей ретинобластомы (Rb) может способствовать гиперпролиферации кератиноцитов полости рта, и недавние данные свидетельствуют о том, что для опухолевого процесса необходима одновременная деактивация как р53, так и Rb. Повышенная экспрессия Bcl-2 и пониженная экспрессия Fas ингибируют апоптоз опухолевых клеток и могут вызывать устойчивость к цитотоксическим препаратам и Т-клеточную цитотоксичность соответственно. Экзогенные мутагены, такие как табак, алкоголь и вирусные онкогены, могут вызывать изменение экспрессии онкогенов и генов-супрессоров опухолей в некоторых случаях плоскоклеточного рака полости рта. Подчеркивается влияние этих механизмов на будущие методы лечения плоскоклеточного рака полости рта (7).

• последние годы разработка противоопухолевых препаратов постепенно трансформировалась от цитотоксических препаратов к повышению селективности препаратов, преодолению множественной лекарственной устойчивости, разработке новых препаратов с низкой токсичностью и высокой специфичностью.

Амигдалин еще называют горьким абрикосом, лаэтрилом, миндалем. Это цианогенное соединение, принадлежащее к

группа ароматических цианогенных гликозидов. Его молекулярная формула: C.20ЧАС27НЕТ11, молекулярная масса 457,42.

Химическая структура: D-манделонитрил-β-D-глюкозид-6-β-глюкозид. Амигдалин широко распространен в растениях, особенно в семенах розоцветных растений, например, абрикоса, персика, вишни, сливы и др. (8, 9).

Сам по себе амигдалин нетоксичен, но при разложении некоторыми ферментами образует HCN, который является

ядовитое вещество (9). Многочисленные исследования подтвердили, что амигдалин оказывает противокашлевое и противоастматическое действие, а также влияет на пищеварительную систему. Кроме того, фармакологические эффекты также включают антиатерогенное действие, ингибирование интерстициального фиброза почек, предотвращение легочного фиброза, устойчивость к повреждению легких, вызванному гипероксией, иммуносупрессию, иммунную регуляцию, противоопухолевое, противовоспалительное и противоязвенное действие (10) (11) (12) (13)

Его использовали для лечения астмы, бронхита, эмфиземы, проказы, колоректального рака и витилиго (11). Амигдалин разлагался до синильной кислоты, которая является противоопухолевым соединением, и бензальдегида, который может вызывать обезболивающее действие, поэтому его можно использовать используется для лечения рака и облегчения боли (14).

Ученые указывают на использование амигдалина при лечении рака. Новое исследование изучило корреляцию между амигдалином и раком простаты. Было показано, что амигдалин индуцирует апоптотическую гибель клеток у клетки рака предстательной железы человека DU145 и LNCaP путем активации каспазы-3 посредством подавления Bcl-2, антиапоптотического белка, и повышения регуляции Bax, проапоптотического белка (14).

Другое исследование изучало, как амигдалин может индуцировать апоптоз в клетках линии клеток рака шейки матки человека HeLa. В клетках HeLa, обработанных амигдалином, развивались типичные апоптотические изменения. Развитие апоптоза в клетках, обработанных амигдалином, было подтверждено двойным окрашиванием обработанных амигдалином клеток аннексином V-FITC и йодидом пропидия (PI) наряду с увеличением активности каспазы-3 в этих клетках (15).

Эффект амигдалина изучался при заболеваниях, отличных от рака, таких как легочный фиброз. В исследовании на крысах экспериментальные группы получали внутрибрюшинное введение амигдалина (15 мг/кг/день). Крыс забивали через 7, 14 и 28 дней после введения блеомицина. Амигдалин может снижать интенсивность пиков дифференциально экспрессируемых белков в сыворотке крыс (10).

Амигдалин эффективен для облегчения воспалительной боли и, следовательно, может использоваться в качестве анальгетика с противовоспалительными средствами.

ноцицептивное и противовоспалительное действие. Проведено исследование антиноцицептивного действия амигдалина, выделенного из Prunus Armeniaca, на крысах. Внутримышечное введение амигдалина достоверно уменьшало вызванную формалином тоническую боль как на ранней (первые 10 мин после инъекции формалина), так и на поздней фазе (10–30 мин после первичной инъекции формалина). На поздней стадии амигдалин уменьшал боль, вызванную формалином, дозозависимым образом в диапазоне доз менее 1 мг/кг (16).

• исследовании in vitro оценивалась противовоспалительная и обезболивающая активность амигдалина. клеточная линия, индуцированная липополисахаридом (ЛПС), и модель крысы с артритом голеностопного сустава, индуцированным каррагинаном. Амигдалин значительно ингибировал экспрессию мРНК TNF-альфа и IL-1beta в обработанных LPS клетках RAW 264.7. Амигдалин (0,005, 0,05 и 0,1 мг/кг) вводили внутримышечно сразу после индукции каррагинан-индуцированной артритной боли у крыс, а антиартритный эффект амигдалина оценивали путем измерения соотношения весового распределения несущих сил обоих стопы и окружность лодыжки, а также путем анализа уровней экспрессии трех молекулярных маркеров боли и воспаления (c-Fos, TNF-альфа и IL-1бета) в спинном мозге. Гипералгезия пораженной артритом лодыжки наиболее значительно облегчалась при инъекции 0,005 мг/кг амигдалина. При этой дозировке экспрессия c-Fos, TNF-альфа и IL-1бета в спинном мозге значительно подавлялась. Однако при дозировке более 0,005 мг/кг обезболивающего эффекта амигдалина не наблюдалось. Таким образом, лечение амигдалином эффективно облегчало реакцию на лечение ЛПС в клетках RAW 264.7 и каррагинан-индуцированный артрит у крыс и может служить анальгетиком для облегчения воспалительной боли (17).

Исследование in vitro изучило влияние амигдалина на рост клеток рака мочевого пузыря.

линии (UMUC-3, RT112 и TCCSUP). Исследовали рост опухоли, пролиферацию, клональный рост и прогрессирование клеточного цикла. Изученными белками, регулирующими клеточный цикл, были cdk1, cdk2, cdk4, циклин A, циклин B, циклин D1, p19, p27. Амигдалин в зависимости от дозы уменьшал рост и пролиферацию во всех трех клеточных линиях рака мочевого пузыря, что отражалось в значительной задержке прогрессирования клеточного цикла и остановке G0/G1. Таким образом, амигдалин может блокировать рост опухоли путем понижающей модуляции cdk2 и циклина А (18).

В другом исследовании сто семьдесят восемь пациентов с раком получали амигдалин плюс

Программа «метаболической терапии», состоящая из диеты, ферментов и витаминов. Подавляющее большинство этих пациентов до лечения находились в хорошем общем состоянии. Одна треть ранее не получала химиотерапию. Никакой существенной пользы с точки зрения излечения, улучшения или стабилизации рака, улучшения симптомов, связанных с раком, или увеличения продолжительности жизни не наблюдалось. В этом исследовании рекомендуется, чтобы пациенты, подвергшиеся воздействию этого агента, были проинструктированы об опасности отравления цианидами, а уровень цианида в их крови должен тщательно контролироваться, поскольку амигдалин является токсичным препаратом, который неэффективен при лечении рака (19).

Новое исследование показало, что амигдалин ингибирует гены, связанные с клеточным циклом в клетках рака толстой кишки человека SNU-C4. Микрочип показал, что амигдалин подавляет активность, особенно генов, принадлежащих к категории клеточного цикла. Анализ ПЦР в реальном времени (ОТ-ПЦР) показал, что уровни мРНК этих генов также снижались при лечении амигдалином в клетках рака толстой кишки человека SNU-C4. Таким образом, это позволяет предположить, что амигдалин оказывает противораковое действие посредством понижающей регуляции генов, связанных с клеточным циклом, в клетках рака толстой кишки человека и может использоваться в качестве терапевтического противоракового препарата (20).

Новое передовое исследование противоопухолевого эффекта амигдалина показало, что амигдалин является естественным

продукт, обладающий противоопухолевой активностью, меньшим количеством побочных эффектов, широкодоступный и относительно недорогой. Все эти особенности делают амигдалин многообещающим противоопухолевым препаратом в сочетании с препаратами условной химиотерапии, которые могут оказывать синергический эффект, что дает новые идеи для разработки новых противораковых препаратов (9).

1. Материалы и методы:

Образец исследования:в него вошли 10 золотистых сирийских хомяков, которые были разделены на две группы: группу случаев, в которой рак был вызван в буккальном мешке, а в качестве лечения применялся амигдалин. Вторая была контрольной группой, в которой был вызван рак, но лечение не проводилось.

Амигдалин: Препарат был извлечен в лаборатории химического коллажа Дамасского университета из косточек горького абрикоса, затем полученный порошок растворяли в дистиллированной воде и готовили для инъекции в брюшину.

Канцерогенный агент: это ДМБА, полициклический ароматический углеводородный канцероген, который наносили на слизистую оболочку щечной сумки хомяков с помощью малярной кисти.

шрамирование: хомячков второй группы умерщвляли через 14 недель, предполагаемый период, в течение которого индуцируется рак в буккальном мешке. В то время как хомяки в основной группе начали получать амигдалин, инъецированный в брюшину, через 14 недель после того, как в их сумке были обнаружены язвы карциномы. Оно длилось 21 день — рекомендуемый период в различных исследованиях.

Образец окрашивания: Образцы были получены и окрашены традиционными красителями (гематоксилином и эозином), затем

были окрашены двумя иммуногистохимическими красителями: P53 и Ki67.

Статистика:

Т-тест Стьюдента использовался для двух отдельных групп, чтобы сравнить экспрессию P53 и Ki67 между группой, принимавшей витамин, и группой больных раком.

1. Обсуждение:

Предполагается, что амигдалин, как дополнительное и натуральное вещество, является терапевтическим средством при многих заболеваниях. Было проведено множество исследований с целью повышения его эффективности при лечении воспалительных заболеваний, а также различных видов рака. Тем не менее, он по-прежнему является потенциально ядовитым материалом из-за выброса цианида в результате его разложения. Кроме того, в литературе недостаточно доказанных данных, чтобы заявить о самом абсолютном механизме действия этого вещества внутри раковых клеток.

Мы провели это исследование, индуцируя плоскоклеточную карциному, как наиболее распространенную карциному ротовой полости, в буккальном мешке золотого сирийского хомячка, используя ДМБА в качестве канцерогенного агента. Затем индуцированный рак лечили инъекцией амигдалина в брюшину.

Амигдалин состоит из двух молекул глюкозы, одной из которых является бензальдегид, который является болеутоляющим средством.

• одна синильная кислота, которая считается противоопухолевым соединением.

• настоящем исследовании противоопухолевые эффекты амигдалина были изучены путем обнаружения митотического

индекс и путь P53 после лечения индуцированной карциномы, сравнивая результаты с результатами контрольной группы.

Ki67 был почти отрицательным у хомяков, получавших амигдалин, тогда как в группе больных раком он был повышен.

P53 также был отрицательным в группе лечения по сравнению с его высоким значением в группе рака.

• литературе нет статей, в которых упоминался бы митотический индекс при изучении влияния

амигдалин, ни путь P53 не изучались.

Клетки рака простаты, обработанные амигдалином, демонстрировали несколько морфологических характеристик.

апоптоз. Исследование показало, что амигдалин увеличивает экспрессию Bax, проапоптотического белка, снижает экспрессию Bcl-2, антиапоптотического белка, и увеличивает активность фермента каспазы-3 в клетках рака простаты

(14).

Тот же путь белков BAX был изучен в клетках рака шейки матки (клетки HeLa), показав

что в клетках HeLa, обработанных амигдалином, развивались типичные апоптотические изменения. (15)

Другое исследование объяснило влияние амигдалина на блокирование рака мочевого пузыря за счет уменьшения циклина А и циклин-зависимой киназы (cdk2), белков, регулирующих клеточный цикл в раковых клетках.

1. Заключение:

• заключение мы обнаружили, что амигдалин индуцирует апоптоз в клетках, подавляя экспрессию P53. Кроме того, амигдалин снижает уровень митотического индекса (Ki67) в этих клетках.

Благодарности:

Это исследование было поддержано грантом Дамасского университета, факультета стоматологии, кафедры патологии полости рта.

Рекомендации

• Ривера С., Венегас Б. Гистологические и молекулярные аспекты плоскоклеточного рака полости рта (обзор). Письма об онкологии. 2014;8(1):7-11. Электронная публикация

25.06.2014.

• Скалли С., Филд Дж. Генетические аберрации при плоскоклеточном раке головы и шеи (SCCHN) в отношении рака полости рта (обзор). Международный журнал онкологии. 1997;10(1):5-21. Электронная публикация 1 января 1997 г.

• Такахама А.-младший, Корреа М.Б., де Алмейда О.П., Лопес М.А. Плоскоклеточный рак полости рта, метастазирующий в кость черепа: описание случая и обзор литературы. Общая стоматология. 2014;62(2):59-61. Электронная публикация 07.03.2014.

• Ллевеллин К.Д., Джонсон Н.В., Варнакуласурия К.А. Факторы риска плоскоклеточного рака полости рта у молодых людей: комплексный обзор литературы. Оральная онкология. 2001;37(5):401-18. Электронная публикация 30 мая 2001 г.

• Майхжак Е., Шибяк Б., Вегнер А., Пиенковски П., Паздровски Дж., Лучевски Л. и др. Плоскоклеточный рак полости рта и ротоглотки у молодых людей: обзор литературы. Радиология и онкология. 2014;48(1):1-10. Электронная публикация 4 марта 2014 г.

• Миллер К.С., Уайт ДК. Экспрессия вируса папилломы человека в слизистой оболочке полости рта, предраковых состояниях и плоскоклеточном раке: ретроспективный обзор литературы. Хирургия полости рта, оральная медицина, патология полости рта, радиология полости рта и эндодонтия. 1996;82(1):57-68. Электронная публикация, 1 июля 1996 г.

• Шугерман П.Б., Джозеф Б.К., Сэвидж Н.В. Обзорная статья: Роль онкогенов, генов-супрессоров опухолей и факторов роста при плоскоклеточном раке

полости рта: случай апоптоза и пролиферации. Заболевания полости рта. 1995;1(3):172-88. Электронная публикация 1 сентября 1995 г.

• Хольцбехер, доктор медицинских наук, Мосс М.А., Элленбергер Х.А. Содержание цианидов в препаратах лаэтрила, семенах абрикоса, персика и яблока. Журнал токсикологии Клиническая токсикология. 1984;22(4):341-7. Электронная публикация 1 января 1984 г.

• Сонг З, Сюй С. Расширенные исследования противоопухолевого действия амигдалина. Журнал исследований и терапии рака. 2014;10 Приложение 1:3-7. Электронная публикация 11 сентября 2014 г.

• Ду Х.К., Сун ФК, Чжоу Х, Ли Х, Чжан Дж.П. Влияние амигдалина на белковый биомаркер сыворотки при фиброзе легких у крыс, индуцированных блеомицином. Чжунхуа лао донг вэй шэн чжи йе бин за чжи = Чжунхуа лаодун вэйшэн чжиебинг зажи = Китайский журнал промышленной гигиены и профессиональных заболеваний. 2010;28(4):260-3. Электронная публикация 15 мая 2010 г.

• Чанг Х.К., Ян Х.И., Ли Т.Х., Шин М.К., Ли М.Х., Шин М.С. и др. Экстракт спермы Armycae подавляет липополисахаридиндуцированную экспрессию циклооксигеназы (коррекция циклоозигеназы)-2 и индуцибельной синтазы оксида азота в клетках микроглии мыши BV2. Биологический и фармацевтический вестник. 2005;28(3):449-54. Электронная публикация 4 марта 2005 г.

• Мирмиранпур Х., Хагани С., Занди А., Халилзаде О.О., Герайеш-Неджад С., Мортеза А. и др. Амигдалин ингибирует ангиогенез в культивируемых эндотелиальных клетках диабетических крыс. Индийский журнал патологии и микробиологии. 2012;55(2):211-4. Электронная публикация 10 июля 2012 г. Чан Тай. Вероятный случай амигдалин-

• индуцированной периферической нейропатии у вегетарианца с дефицитом витамина B12. Терапевтический лекарственный мониторинг. 2006;28(1):140-1. Электронная публикация 19 января 2006 г.

• Чанг Х.К., Шин М.С., Ян ХИ, Ли Дж.В., Ким Ю.С., Ли М.Х. и др. Амигдалин индуцирует апоптоз посредством регуляции экспрессии Bax и Bcl-2 в клетках рака простаты человека DU145 и LNCaP. Биологический и фармацевтический вестник. 2006;29(8):1597-602. Электронная публикация 2 августа 2006 г.

• Чен Ю, Ма Дж, Ван Ф, Ху Дж, Цуй А, Вэй С и др. Амигдалин индуцирует апоптоз в клетках линии клеток рака шейки матки человека HeLa. Иммунофармакология и иммунотоксикология. 2013;35(1):43-51. Электронная публикация 10.11.2012.

• Хван Х.Дж., Ким П., Ким С.Дж., Ли Х.Дж., Шим И., Инь К.С. и др. Антиноцицептивный эффект амигдалина, выделенного из Prunus Armeniaca, на боль, вызванную формалином, у крыс. Биологический и фармацевтический вестник. 2008;31(8):1559-64. Электронная публикация 2 августа 2008 г.

• Хван Х.Дж., Ли Х.Дж., Ким СиДжей, Шим И, Хам Д.Х. Ингибирующее действие амигдалина на экспрессию мРНК TNF-альфа и IL-1beta, индуцируемую липополисахаридами, и каррагинан-индуцированный артрит крыс. Журнал микробиологии и биотехнологии. 2008;18(10):1641-7. Электронная публикация

29.10.2008.

• Макаревич Дж., Рутц Дж., Юнгель Э., Каульфус С., Райтер М., Цаур И. и др. Амигдалин блокирует рост клеток рака мочевого пузыря in vitro за счет уменьшения циклина А и cdk2. ПлоС один. 2014;9(8):e105590. Электронная публикация 20 августа 2014 г.

• Мортель К.Г., Флеминг Т.Р., Рубин Дж., Кволс Л.К., Сарна Г., Кох Р. и др. Клинические испытания амигдалина (Лаэтрила) при лечении рака у человека. Медицинский журнал Новой Англии. 1982;306(4):201-6. Электронная публикация 28 января 1982 г.

• Пак Х.Дж., Юн С.Х., Хан Л.С., Чжэн Л.Т., Юнг К.Х., Ум Ю.К. и др. Амигдалин ингибирует гены, связанные с клеточным циклом в клетках рака толстой кишки человека SNU-C4. Всемирный журнал гастроэнтерологии: WJG. 2005;11(33):5156-61. Электронная публикация 30 августа 2005 г.

Научно-исследовательский журнал в области фармацевтики, биологии и химии

Лаэтрил или Амигдалин (витамин В-17)–Питательное вещество Или лекарственное средство: ОбзорТекущие противоречия.

МИСТЕР Сучитра и С. Партхасарати*.1Факультет биохимии Университета ШАСТРА, Тамилнад, Индия.2Медицинский колледж и Исследовательский институт имени Махатмы Ганди, Университет Шри Баладжи Видьяпита, Пудучерри– Южная Индия

Аннотация

Амигдалин / Витамин В17/ Лаэтрил - цианогенный диглюкозид, активный ингредиент нескольких фруктовых косточек
и сырых орехов, которые, как считалось, обладают противораковыми свойствами. Амигдалин содержится в косточках некоторых косточковых
фруктов, таких как абрикос, горький миндаль, персик и слива, а также в косточках яблока. Несмотря на то, что существует
несколько исследований на животных и людях, которые демонстрируют преимущества амигдалина при раке, они недостаточно хорошо
установлены в рандомизированных клинических испытаниях. При рассмотрении других заболеваний, таких как гипертония, боль и
бронхиальная астма, необходимо изучить роль Лаэтрила, используя этот препарат в качестве дополнения к обычным
терапевтическим стратегиям. Но как таковые, не следует отказываться от употребления абрикосовых косточек и яблочных косточек из
опасения отравления амигдалином ввиду их других полезных свойств.Ключевые слова:лаэтрил, амигдалин, витамин В17,* Автор-корреспондентISSN: 0975-8585Январь– Февраль2019RJPBCS10(1)Страница № 438ВВЕДЕНИЕ И ХИМИЯ

Витамин В17 / Амигдалин/Лаэтрил - один из самых противоречивых витаминов за последние три десятилетия.
Химически это цианогенный диглюкозид, но с конденсированной формулой C20-H27-NO-11 и MW
(молекулярной массой) 457. Он имеет химическое название дманделонетрил-бетаглюкозид-6 бета-D-глюкозид.
Впервые амигдалин был изобретен в начале девятнадцатого века во Франции в качестве активного компонента некоторых фруктов
с косточками и сырыми орехами.[1] Считалось, что цианид, один из важных метаболитов амигдалина, обладает противовоспалительным действием.-
обладает противораковыми свойствами и был введен в Соединенных Штатах в качестве противоопухолевого препарата в 1920-х годах. На протяжении многих лет использовалось несколько
лекарственных форм Лаэтрила, которые включали пероральные, перитонеальные, внутривенные и
внутримышечные препараты. Пероральная форма является наиболее мощным из препаратов. Любое вещество может
считаться настоящим витамином только тогда, когда оно необходимо для нормального функционирования клеток. Лаэтрил не вписывается в
это. Следовательно, называть его витамином - большой вопрос. Витамины - это вещества, которые должны быть обязательно включены в
диета для поддержания здоровья и профилактики определенных заболеваний при их дефиците. Они не могут синтезироваться в
организме. Отсюда название витамин, на самом деле неправильное для обозначения амигдалина. Лаэтрил представляет собой полусинтетическое соединение амигдалина,
синтезированное из амигдалина путем гидролиза. [2] Название витамин B-17 было дано лаэтрилу Э.Т. Кребсом-младшим, но
оно не одобрено Комитетом по номенклатуре витаминов Американского института питания.
Манделонитрил относится к части молекулы лаэтрила, из которой при разложении выделяется цианид. В
таблетке лаэтрила по 500 мг может содержаться от 5-51 мг цианистого водорода на грамм.[3]ИСТОЧНИКИПредпочтительным коммерческим источником лаэтрила являются абрикосовые косточки (например, Prunusarmeniaca).
Амигдалин содержится в нескольких косточковых фруктах, таких как горький миндаль (5%), абрикос (1,4%), персик (0,68%),
и слива (0,04-1,7%), он также содержится в семенах яблок (0,3%).[4] Из
плода вынимают косточки, раскалывают, чтобы получить ядра, которые сушат в духовке или на солнце. Затем ядра отваривают в этиловом
спирте и после выпаривания добавляют диэтиловый эфир. Химический амигдалин теперь осаждается в виде мелких
белых кристаллов. [5]